百恩维生物提供两种筛选稳定细胞株的方法:
1、转染质粒后,单克隆方法筛选稳定细胞系。
2、慢病毒感染筛选稳定细胞株。
病毒感染方法较质粒转染筛选单克隆方法更方便和高效,是目前主流的稳定细胞系筛选方法。用慢病毒制备稳转细胞株,由于其高效整合、高效转录、高效表达、宿主范围广,感染效率高,且与细胞染色体整合而不发生基因重排,是制备稳定细胞株的理想载体。
百恩维有着多年构建稳转细胞株的经验,已在H1299、THP-1、MCF7/ADR、A549、V79、MC3T3-E1、CHO、SiHa、3D4/2、HL7702、SW480、HepG2、SGC-7901、MGC-803、HT-29、Saos-2、U-2os、PC12、SK-BR-3、MCF-7、HMSC-ad 、GIST-T1、HEK293、293T等多个种属细胞中成功构建过表达和RNAi稳转细胞株。
产品特点:
1、稳定:保证15代以内稳定转染细胞稳定表达。
2、迅速:一般控制在1个月以内完成构建。
3、经济:价格实惠,性价比高。
4、质量保证:对外源基因进行严格鉴定。
稳定转染细胞株服务流程
1、筛选浓度测定:以 10-14 天细胞全部死亡的抗生素浓度为筛选浓度。
2、细胞接种:转染实验前天接种细胞,各种细胞的平板密度依据各种细胞的生长率和细胞形状而定。进行转染当天细胞应达到 60%-80% 覆盖。
3、细胞转染:用构建好的载体(或包装好的病毒)转染目的细胞。
4、抗生素筛选。
5、鉴定筛选结果。
客户需要提供
1、构建好的外源基因载体(如果您还没有外源基因及载体,可以选用百恩维的载体构建服务。)。
2、待转染的细胞系( 1×106 个细胞,可传代,倍增时间小于 48 小时),特殊细胞需提供培养基。
3、关于细胞培养条件的说明。
我们提供
1、构建好的稳定细胞株。
2、构建稳转细胞株实验报告。
相关技术服务及产品:
病毒包装
蛋白表达与纯化
转染试剂