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Polyfectine转染试剂
产品简介：
Polyfectine转染试剂是百恩维生物公司（Biowit Technologies）最新研发合成的新型纳米聚合物高效转染试剂，既可以转染分裂细胞也可以转染非分裂细胞。由于纳米技术的应用，Polyfectine在细胞转染过程中，表现了卓越的低毒、高效的性能，可用于悬浮细胞（如293-F、CHO-S等）的转染，更可用于In vivo动物体内的高效转染。
产品货号：PL0001
运输与储存：常温运输，储存于4℃，有效期12个月
贴壁细胞操作步骤：（以6孔板为例）
1. 在转染前一天按每孔3～5×105个细胞接种细胞。
2. 转染复合物的制备：
⑴ 取4μg DNA 用250μl无血清稀释培养基（建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或RPMI1640）稀释，充分混匀，制成DNA稀释液。
⑵ 取4～8μl Polyfectine加入到DNA稀释液中，充分混匀，室温静置15分钟。
3. 转染 ：
将转染复合物加入到含有细胞和完全培养基的6孔板中，轻柔混匀,培养4～6小时后更换培养基，于37℃ ，5% CO2培养箱中继续培养24～48h。
表格：不同细胞培养容器转染用量
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细胞培养容器
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细胞培养面积
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需要培养基的量
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稀释用培养基的量
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DNA转染
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RNAi转染
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DNA
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Polyfectine
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RNA
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Polyfectine
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||||
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96孔板
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0.3cm2
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100ul
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25ul
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0.2ug
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0.2～0.4ul
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5pmol
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0.1～0.2ul
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24孔板
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2cm2
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500ul
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50ul
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0.8ug
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0.8～1.6ul
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20pmol
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0.4～0.8ul
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12孔板
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4cm2
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1ml
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100ul
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1.6ug
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1.6～3.2ul
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40pmol
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0.8～1.6ul
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6孔板
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10cm2
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2ml
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250ul
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4.0ug
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4.0～8.0ul
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100pmol
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2.0～4.0ul
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60mm平皿
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20cm2
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5ml
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0.5ml
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8.0ug
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8.0～16ul
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200pmol
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4.0～8.0ul
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100mm平皿
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60cm2
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15ml
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1.5ml
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24ug
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24～48ul
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600pmol
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12～24ul
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悬浮细胞操作步骤：（以50ml培养液为例）
1. 在转染前一天按6～7×105个细胞/ml接种细胞，待转染时细胞密度应在1×106个细胞/ml。
2. 转染复合物的制备：
⑴ 取50μg DNA 用2ml无血清完全培养基稀释，充分混匀，制成DNA稀释液。
⑵ 取50～100μl Polyfectine加入到DNA稀释液中，充分混匀，室温静置15分钟。
3. 转染 ：
将转染复合物加入到含有48ml细胞和无血清完全培养基的125ml细胞培养摇瓶中，轻柔充分混匀，125rpm，37℃ ，8% CO2细胞培养摇床中继续培养24～96h。
产品用于：
仅供研究使用，不适用于人或动物的体外诊断与治疗。