酶是从发酵液或天然产物中抽提并提纯的产品。抽提水溶液中含有少量酶,但含胸有成竹量悬浮形物、高分子和低分子杂质等。目前已采用的浓缩精制方法有沉淀法、吸咐法、色谱法、冻结法、真空浓缩法和超速离心等,但分离精制效果和费用较高。而膜分离法是利用膜两侧的压力差,使水和小分子物质透过膜,而酶等大分子物质则被截留在膜内,从而实现对酶的浓缩精制。
目前国际上用超滤技术对粗酶液进行浓缩精制,在美国、日本、丹麦等已进行了规模化生产。
》超滤技术浓缩精制蛋白酶数据表:
原液
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250L,PH4.95,固形物
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浓缩
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11L,PH3.6%,酶收率100%
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透过液
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239L,固形物9.1%
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不纯物去除率
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0.296×11(0.296×11+0.091×239)=0.13,去除率83%
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》集成膜分离系统的技术特点:
■ 在常温下浓缩提纯,减少了温度对酶制剂活性的影响,分离的产品纯度好,质量和收率高;
■ 与真空蒸发相比,超滤的能耗低,两者的能耗比为1:8;
■ 与盐析沉定\溶剂萃取法相比,可以省去无机盐及有机溶剂,如硫酸铁、硫酸镁、乙醇、丙酮等助剂消耗,既降低成本,又减少了对环境的污染,操作简单。
》微滤+超滤技术浓缩酶制剂的工艺流程图: