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头抱菌素C酰化酶突变位点的研究

日期:2015-03-11     浏览:276    下载:0     体积:706.74K     评论:0    


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徐雪丽‘}2张伟‘刘艳‘谢丽萍‘胡又佳
(1中国医药工业研究总院张江分院上海201203  2上海医药工业研究院上海200437)
摘要头袍菌素C I}化酶能直接将头袍菌素C(CPC)转化为7基头袍烷酸(7-ACA),此一步酶
法具有很大的经济价值,所以得到很多研究者的关注,特别是提高CPC酰化酶活性及专一性的研
究。以CPC酰化酶基因。cs50为基拙,利用重叠延伸PC R,对文献报道的活性提高的突变体酶S12
的6个位点分另,」进行突变,将得到的6个突变体V122A,G140S,F`297N,I314T,I415V,S710L进行
诱导纯化后,检测酶活,以此来研究不同突变位点对酶活力的影响。结果V122A的比活为
106U/mg,它的转化效率比初始酶提高23.7% o
关键词C PC酰化酶 重叠延伸 PCR酶活 头袍菌素C  7-氨基头袍烷酸
 
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