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汪正华朱蓓霖赵云周杰吴自荣黄静*
(华东师范大学生命科学学院上海200241)
摘要蛋白质谷氨酰胺酶( Protein-glutaminase , PG)是引起蛋白质脱酰胺作用的一种新型水解酶，
在食品工业中具有十分广泛的应用前景。通过重叠延伸PC R法合成了PG全长基因，将其成熟肤
序列克隆至原核表达载体pET32a(十)上，转化大肠杆菌BI,21 ( DE3 )，经IPTG诱导，重组蛋白主
要以包涵体形式表达。通过降低诱导温度和共表达分子伴侣两种策略，以期实现重组蛋白的可
溶性表达，结果发现低温对可溶性的提高有一定的作用，而分子伴侣影响甚微。收集包涵体经变
性、复性后获得活性PG。将PG与底物Cbz-Gln-Gly进行孵育反应，结果表明，PG可有效水解Cbz-
Gln-Gly谷氨酰胺残基上的氨酞基，释放出氨;酶学性质的研究表明，此酶的最适反应温度为
40 0C，最适作用pH为6. 0。实验为PG酶的研究和开发提供了理论依据和重要参考。
关键词蛋白质 谷氨酰胺酶 重叠延伸 PCR脱酰胺 作用性质研究
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