周 威1,2 张学文1,2 庄以彬2 刘晓楠2
殷 华2 郁 彭1 刘 涛2
1.天津科技大学生物工程学院,天津 300457;2.中国科学院天津工业生物技术研究所,天津 300308
摘要 波卓霉素是从波卓链霉菌(Streptomycesbottropensis)中分离得到的,具有抗革兰氏阳性菌及支原
体的生物活性,尤其重要的是对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和抗万古霉素肠球菌有抑菌活性。试验通过构建基
因组文库,PCR筛选获得包含完整波卓霉素合成基因簇的柯斯质粒4E11,通过接合转移的方法把4E11转化至
天蓝色链霉菌 M145中,对获得的异源表达株 M145/4E11进行发酵,通过提取纯化和 HPLC-MS检测,表明
M145/4E11发酵液中产生了波卓霉素;试验并通过 Red/ET重组系统,以红霉素启动子(ermE*P1)替换了波卓
霉素生物合成簇抗性基因btmA 和前提肽合成基因btmD 的启动子,成功实现异源表达株 M145/4E11波卓霉素
的产量提高。
关键词 波卓链霉菌;波卓霉素;基因组文库;异源表达;启动子替换
中图分类号 Q785 文献标识码 A 文章编号 1000-2421(2015)01-0049-10
