黄云雁黎明刘萌孙听周丽颖路福平
(天津科技大学生物工程学院工业发酵微生物教育部重点实验室工业酶国家工程实验室
天津市工业微生物重点实验室,天津300457)
摘要:旨在提高谷氨酸棒杆菌合成尸胺的能力,将C adB克隆至谷氨酸棒杆菌中,与LDC共表达,在谷氨酸棒杆菌合成
尸胺的同时,帮助尸胺转运至细胞外,解除尸胺的反馈抑制作用。谷氨酸棒杆菌能够高产赖氨酸脱竣酶的底物L一赖氨酸,但不含
ldc和cadB基因,因而不能够直接合成尸胺。从E. coliK12中克隆出赖氨酸一尸胺反向转运蛋白基因,与绿色荧光蛋白基因g华融
合构建成融合表达载体pXBG,并转化至谷氨酸棒杆菌进行诱导表达,结果表明表达的C adB蛋白可以止确的定位于谷氨酸棒杆菌
的细胞膜上。将基因cadB连接到含有赖氨酸脱竣酶基因的pXM J19-ldc上,构建成能够共表达赖氨酸脱竣酶和赖氨酸一尸胺反向转
运蛋白的重组质粒pXLB,并转化到谷氨酸棒杆菌中。
关键词:尸胺赖氨酸一尸胺反向转运蛋白C adB谷氨酸棒杆菌赖氨酸脱梭酶共表达