刘伟郑璞**靳新娜
(江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室无锡214122)
摘要为探究和阻断嗜乙酰乙酸棒杆菌乙酸代谢途径，提高缺氧条件下琥珀酸的产率，减少副产
物乙酸的合成，以G. acetoacidophilum }LdhA为出发菌株，利用同源重组的方法分别敲除磷酸乙酰
转移酶、乙酸激酶,CoA转移酶和丙酮酸脱氢酶复合体的相关基因pta, ackA, ctfA与aceE，研究突
变菌产琥珀酸过程中相关参数的变化。
结果表明:敲除pta与ackA基因后，对乙酸浓度，糖耗速率和糖酸转化率影响不大;pta,ackA与ctfA基因的同时失活使得乙酸的浓度和摩尔转化率分别降低81.4%和77.2% ,葡萄糖消耗速率下降28.3% ,琥珀酸对葡萄糖摩尔转化率提高25.3%;而单独敲除aceE基因后，乙酸几乎不产生，葡萄糖消耗速率下降35.6% ,琥珀酸对葡萄糖摩尔转化率提高34.7 %。因此，缺氧条件下，嗜乙酰乙酸棒杆菌的乙酸合成几乎全部走乙酰CoA途径，pta ,ackA与ctfA是由乙酰CoA合成乙酸途径中最主要的基因;敲除基因aceE，可以完全阻断乙酸生成，有效提高琥珀酸产率。
关键词 嗜乙酰乙酸棒杆菌 乙酸 琥珀酸 代谢阻断
