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脂肪甘油三醋脂酶载体构建

日期:2015-07-03     浏览:257    下载:0     体积:1.16M     评论:0    


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 李松涛,果晓霞,吕琳,李颖,孙长;qJl}
(哈尔滨医科大学公共卫生学院,哈尔滨150080
摘要:目的:研究旨在构建脂肪甘油三醋脂酶( adipose triglyceride lipase  ATGL)基因的表达载体方法:
调取C57BL/6小鼠ATGL基因的cDNA文库,并使用高保真Taq酶克隆出含有相应酶切位点的ATGL编码区
全序列,并通过基因测序验证序列准确性得到的目的基因片段利用T4链接酶接入pBluescript II质粒中,并
再一次通过基因测序确定重组质粒连接的准确性建好的质粒继而转染HEK293细胞,检测细胞中ATGL的
mRNA和蛋白水平结果:PCR产物双酶切和基因测序确定连接正确,细胞中ATGL的mRNA和蛋白表达量
显著增高结论:成功构建了C57BL/6小鼠ATGL基因的表达载体,建好的载体可用于ATGL基因功能的后
续研究
关键词:预防医学与卫生学其他学科;脂肪甘油三醋脂酶;C57BL/6小鼠;载体构建
中图分类号:R-331文献标识码:A文章编号:1674-2850(2015)11-1204-OS
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