湖南师范大学生命科学学院 微生物分子生物学国家重点实验室培育基地，湖南 长沙 410081
罗林根, 杨燕, 魏慧, 等. 须糖多孢菌Saccharopolyspora pogona 的核糖体工程改造对丁烯基多杀菌素合成的影响. 生
物工程学报, 2016, 32(2): 259–263.
Luo LG, Yang Y, Wei H, et al. Effect of ribosome engineering on butenyl-spinosyns synthesis of Saccharopolyspora pogona.
Chin J Biotech, 2016, 32(2): 259–263.
摘 要: 核糖体工程是以微生物的各类抗生素抗性突变为筛选标记，高效获得次生代谢产物合成能力提高的突变株的一种育种新方法。通过核糖体工程技术，使用链霉素对须糖多孢菌Saccharopolyspora pogona 进行抗性选育，以获得高产丁烯基多杀菌素突变菌株。对原始菌株和所获得的突变菌株代谢产物的研究发现，相对于原始菌株，其中突变株S13 的丁烯基多杀菌素产量提高幅度最大，相比原始菌株提高了1.79 倍。经质谱测定表明，其代谢物中比原始菌株多了一种丁烯基多杀菌素组分Spinosyn α1。对抗性突变株S13 的DNA 序列进行分析，发现在编码核糖体S12蛋白的rpsL 基因保守区域中出现点突变，第314 位和第320 位的胞嘧啶(C)分别突变为腺嘌呤(A)和胸腺嘧啶(T)，对应的氨基酸残基分别由脯氨酸突变为谷氨酰胺，丙氨酸突变为缬氨酸。研究显示，突变株S13 遗传稳定性良好。
关键词: 核糖体工程，放线菌，丁烯基多杀菌素，链霉素，次级代谢
