摘 要:
【目的】提高杀真菌素链霉菌发酵生产恩拉霉素的产量。
【方法】利用定点突变技术,对 恩拉霉素生产菌株杀真菌素链霉菌 F1 中影响细胞次级代谢及抗生素合成的核糖体 S12 蛋白的编 码基因 rpsL 进行改造,将第 43 位的赖氨酸(Lys)分别替换为天冬酰胺(Asn)和精氨酸(Arg),并对 改造菌株 L-M1(Asn43)和 L-M2(Arg43)的生长特性、抗生素合成以及摇瓶发酵性能进行研究。
【结 果】与野生型菌株相比,改造菌株的生长特性及生理生化特性均发生了明显的改变:产孢周期明 显缩短,野生型菌株在 MS 培养基中,28 °C 下需要培养 5−7 d 后才能产生孢子,而在相同条件 下,改造菌株 3 d 后就能产生大量的孢子;恩拉霉素产量相对提高,摇瓶发酵条件下,改造菌株 L-M1(Asn43)和 L-M2(Arg43)的恩拉霉素产量分别可达到 1 334 U/mL 和 1 456 U/mL,与野生型菌 株 F1 相比分别提高了 11.9%和 22.1%。
【结论】通过遗传改造,恩拉霉素的产量得到了提高,为 其他位点的遗传改造提供了可行性。 关键词:恩拉霉素,抗生素,抗真菌素链霉菌,遗传改造,核糖体 S12 蛋白,定点突变