马宁,朱康佳,毛银,邓禹
江南大学 粮食发酵工艺与技术国家工程实验室,江苏 无锡 214122
摘 要: 乙醇酸 (Glycolate) 是一种在工业上有多种用途的重要化合物。本研究首先在大肠杆菌 MG1655(DE3) 中敲除了 ldhA (乳酸脱氢酶),获得菌株 Mgly1,作为出发菌株。然后通过调节乙醇酸合成途径的关键酶——异柠 檬酸裂解酶 (aceA)、乙醛酸还原酶 (ycdW)、异柠檬酸脱氢酶激酶/磷酸化酶 (aceK) 的表达水平,得到乙醇酸产 率为 0.24 g/g 葡萄糖 (占理论产率的 28.2%)。过量表达柠檬酸合成酶 (gltA),乙醇酸产率提高到 0.326 g/g 葡萄糖 (占理论产率的 38.3%)。然后在 Mgly1 中敲除了 glcB 和 aceB (苹果酸合成酶),减少了乙醇酸合成的前体乙醛酸 的消耗。最终获得的工程菌株 Mgly335 乙醇酸产率达到 0.522 g/g 葡萄糖 (占理论产率的 61.4%)。
关键词: 乙醇酸,生物合成,发酵,大肠杆菌