孙锐1，2 ，刘明1，2 ，宫彩霞1，2 ，王蔚1，2 ，曾爱兵3 ，李爱英1，2*
1 华中师范大学生命科学学院，武汉 430079
2 华中师范大学农药与化学生物学教育部重点实验室，武汉 430079
3 温州医学院生命科学学院，温州 325035
摘要:美达霉素是链霉菌产生的具有强抗肿瘤活性的芳香聚酮类抗生素，其砒喃环并内酯结构对于其抗癌活性非常重要。位于美达霉素生物合成基因簇中的基因 med-ORF12 编码立体专一性酮基还原酶，可能参与美达霉素的砒喃环并内酯结构中手性中心(C3 S) 的形成，但在美达霉素产生菌中的功能和表达还未曾研究。
【目的和方法】为了研究 med-ORF12 在野生菌中的表达情况以及与美达霉素生物合成的关系，本文采用了原核表达、抗体制备、免疫杂交等技术方法对这个基因展开了体内表达研究。
【结果】首先利用 pET 载体建立了 med-ORF12 的原核表达系统，在优化诱导表达条件的基础上获得了可溶性目的蛋白，制备了相应的多抗血清;然后利用多抗血清对美达霉素产生菌中的基因 med-ORF12 的表达情况进行了检测，表明在美达霉素产生菌中参与次生代谢的 med-ORF12 在稳定期大量表达，同时伴随美达霉素的大量积累。
【结论】这些结果表明在美达霉素产生菌中，基因 med-ORF12 参与次生代谢，其表达与美达霉素生物合成有一定相关性。
关键词: 链霉菌，次生代谢，美达霉素，立体专一性酮基还原酶
