嗜热网球菌纤维二糖差向异构酶在枯草芽孢杆菌中的表达及发酵优化

中国生物工程杂志 ChinaBiotechnology，2019，39（7）：2431 DOI：10.13523／j.cb.20190704 '
王鑫淼 张 康 陈 晟 吴 敬''
（1江南大学食品科学与技术国家重点实验室
江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室
教育部食品安全国际合作联合实验室 无锡 214122）

摘要 通过化学方法合成嗜热网球菌
（Dictyoglomusthermophilum）来源的纤维二糖差向异构酶基因 ce，将其引入到载体 pBSuL3ce，构建重组质粒 pBSuL3ce并转化进枯草芽孢杆菌，发酵 48h后测定胞内酶活为 7.5U／ml。酶学性质结果表明：该酶的最适 pH为 8.5；最适温度为 85C，85C的半衰期为 120min。为降低发酵成本，对发酵培养基进行优化：以 35g／L豆粕粉为氮源、5g／L甘油为碳源时，酶活力最高可达 12.3U／ml。依据摇瓶优化的条件在 3L发酵罐中扩大培养，胞内酶活达到 56U／ml，比摇瓶培养酶活提高了 8倍。利用发酵所得酶制备乳果糖，在乳糖浓度为 400g／L、反应温度为 85C、初始 pH8.5、加酶量为 20U／ml的条件下，乳果糖转化率可达51%。

关键词 嗜热网球菌 纤维二糖差向异构酶 枯草芽孢杆菌 酶学性质 发酵优化