史超硕 李登科 曹 雪 袁 航 张钰文 于江悦 路福平 李 玉
（天津科技大学生物工程学院 工业发酵微生物教育部重点实验室 天津 ３００４５７）
摘要 背景：碱性蛋白酶（ａｌｋａｌｉｎｅｐｒｏｔｅａｓｅ）是一种具有广泛用途的工业酶制剂，其发酵活力目前
仍不能满足工业生产需要。目的：旨在通过优化启动子及其组合来提高ＢａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓＷＢ６００中
碱性蛋白酶ＡｐｒＥ的产量。方法：以ＢａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓＷＢ６００为出发菌株，成功构建了含有４种不同
类型启动子（Ｐ１、Ｐ２、Ｐ１２、Ｐ２１）的碱性蛋白酶ＡｐｒＥ表达菌株。结果：含不同启动子的４株重组
菌均可成功表达碱性蛋白酶，发酵４８ｈ，含单一启动子Ｐ２的重组菌株表达碱性蛋白酶的活力为
４０４１Ｕ／ｍｌ，是Ｐ１的１．２３倍。双启动子重组菌Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓＷＢ６００／Ｐ２１ａｐｒＥ表达的酶活性最高，
是双启动子Ｐ１２的１．３５倍，达到了６１２５Ｕ／ｍｌ。结论：为工业化高产碱性蛋白酶提供了一种有
效策略。
关键词 启动子 碱性蛋白酶 异源表达 酶活力
