L 茶氨酸是仅存于茶树和少数真菌中的一类特殊天然氨基酸, 是茶叶中的重要风味物质, 常作为添加 剂广泛应用于各种食品中. 茶氨酸还有降血压、增强抗癌药物的疗效、提高免疫力、松弛神经紧张等作用, 有广泛的应用价值和较好的实用前景[ 1 ] . 谷氨酰转肽酶 ( g lutamyl transpeptidase, GGT, EC 2322)
广泛存在于微生物中, 可以将谷氨酰胺上的 谷氨酰基转移到乙胺上合成茶氨酸[ 2] . 为了提高微生物中 谷氨酰转肽酶的表达量, 本实验室从大肠杆菌 k- 12中克隆出 gg t基因片段, 构建了重组质粒 pGEX 4T1 /gg ,t 并将其转化至大肠杆菌 BL21( DE3) 中, 以乳糖作为诱导剂表达 GGT 酶[ 3] . 本研究利用此 GGT酶催化, 以谷氨酰胺和乙胺为底物, 进行酶促反应. 完全反应后, 主要成分为 L 茶氨酸和副产物聚谷 氨酸 ( PGA ), 杂质有氯离子、乙胺以及少量谷氨酰胺和谷氨酸.
聚谷氨酸是一种可由微生物大量合成的氨基酸聚合物, 由 D 或 L型的谷氨酸通过 酰胺键连接而 成, 具有水溶性和可生物降解性. 聚谷氨酸及其衍生物可广泛用作药物缓释材料, 土壤、沙地的蓄水保水 剂, 食品的水凝胶以及高强度纤维等[ 4] . 本研究通过弱酸性阳离子树脂和弱碱性阴离子树脂串联双柱离 子交换层析处理 GGT酶反应液, 使 L 茶氨酸与聚谷氨酸、乙胺和氯离子分离, 得到进一步纯化, 同时得到 极有经济价值的聚谷氨酸.
