基因组重排技术选育乙醇高产菌株

 摘要　里氏木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｅｓｅｉ）被认为是最合适联合生物加工（ｃｏｎｓｏｌｉｄａｔｅｄｂｉｏｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ）的微生物之一。原始里氏木霉菌株产乙醇能力太低，需要进一步提高其产酒量。我们通过基因组重排技术提高了里氏木霉菌株产乙醇能力和乙醇耐受力。首先对 ＣＩＣＣ４０３６０菌株孢子进行 ＮＴＧ诱变得到正向突变菌株，再以此为出发菌株进行基因组重排。进行基因组重排后，重组菌株在含不同乙醇浓度的原生质体再生培养基上进行筛选。突变菌株和原始菌株一起做摇瓶发酵实验进行比较以确定产乙醇能力的提高。经过两轮基因组重排后，筛选获得表现最优异的重组菌 Ｓ２２５４。该菌株能在利用５０ｇ／ｌ葡萄糖发酵出６．２ｇ／ｌ乙醇，同时能耐受３．５％ （ｖ／ｖ）浓度乙醇。上述结果表明，本实验采用的基因组重排技术能够有效而且快速获得具有目的性状的优良菌株。