酿酒酵母首次利用多酶组装法提高法尼烯/醇产量

已知酿酒酵母转座子结构基因中TyA编码的蛋白可自组装成病毒样贝壳形蛋白，据此研究人员推测如果将法尼烯和法尼醇途径中3个关键基因和TyA融合表达，则可实现关键酶的定位靠近，有望加速反应进行，提高产量。实验发现融合表达菌株相比于单独表达菌株，法尼烯产量提高11倍，达到200 mg/l；法尼醇产量也有显著提高。并且TyA均置于酶表达基因C端对法尼烯合成最有利，而对法尼醇置于N端或C端影响不是很大。分批补料发酵7天，融合表达菌株法尼烯产量可达到930 mg/l，对照为300 mg/l。法尼醇产量为882 mg/l，对照为231 mg/l。

为了进一步验证产量提高的确是依赖TyA蛋白定位的功劳，研究人员还尝试纯化分离表达的蛋白，发现多集中于沉淀，而非融合蛋白在上清，暗示这3个蛋白可能与脚手架TyA一起形成大的复合体结构集中于沉淀。同时扫描电镜观测融合菌株中的TyA蛋白颗粒要明显大于非融合菌株，以上实验都暗示3个酶和TyA组合在一起形成复杂蛋白结构。