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天津工生所马延和实验室改造谷氨酸棒状杆菌产L-半胱氨酸 发酵水平1克/L

   日期:2019-01-18     来源:中国科学院上海生命科学研究院湖州工业生物技术中心    浏览:1816    评论:0    
核心提示:中科院天津工业生物技术研究所马延和实验室对谷氨酸棒状杆菌(食品级微生物)进行设计与改造,以合成L-半胱氨酸,相关研究结果发表在《Applied Microbiology and Biotechnology》杂志。
  
 江源 摘译

自:https://link.springer.com/article/10.1007%2Fs00253-018-9547-7

 

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L-半胱氨酸是一种有价值的含硫氨基酸,已广泛用于食品、农业和制药工业。由于合成过程涉及复杂的调节,因此尚未实现有效合成L-半胱氨酸的细胞工厂。中科院天津工业生物技术研究所马延和实验室对谷氨酸棒状杆菌(食品级微生物)进行设计与改造,以合成L-半胱氨酸,相关研究结果发表在《Applied Microbiology and Biotechnology》杂志。

 

研究者首先通过缺失L-半胱氨酸脱硫酶编码基因和过表达丝氨酸乙酰转移酶编码基因,构建了初始合成58.2±5.1mg/L L-半胱氨酸的菌株CYS-2。然后通过代谢工程改造以进一步提高L-半胱氨酸的合成,包括使用强启动子tac-M增强CysE的表达强度,寻找对反馈抑制不敏感的丝氨酸乙酰转移酶,过表达L-半胱氨酸合成酶以获得更多代谢通量,测试异源L-半胱氨酸转运蛋白的外排性能,模块化L-半胱氨酸合成前体L-丝氨酸的合成过程以增加L-丝氨酸合成,并使用硫代硫酸盐作为碳源。最后,通过加入6g/L Na2S2O3,工程菌株CYS-19的L-半胱氨酸发酵浓度可达947.9±46.5mg/L,比初始菌株的合成高了约14.1倍,是现有报道中合成L-半胱氨酸水平最高的谷氨酸棒状杆菌。

 
 
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