“植物半纤维素生物质转化酶产生菌的筛选及工程菌株的构建”课题日前通过验收
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由东北林业大学林学院包怡红副教授课题组承担的黑龙江省青年科学技术专项资金项目“植物半纤维素生物质转化酶产生菌的筛选及工程菌株的构建”课题日前通过验收。本课题经过两年多的艰苦努力，取得成功。
在省青年技术资金的资助下，该课题组围绕着木聚糖酶产生菌的筛选、鉴定、工程菌株的构建、产酶条件优化、酶学性质和酶的晶体结构等方面进行了研究并取得成果。通过木聚糖酶产生菌的初筛、复筛和DNS法筛选，从落叶松和白桦林地表层土壤中筛选出三株木聚糖酶产生细菌；菌落形态和生理生化特性以及16SrDNA序列分析，鉴定三株菌都是类芽孢杆菌；通过正交试验确定最佳产酶培养基配方和最优培养条件；从类芽孢杆菌中克隆得到木聚糖酶基因xyn1，将其构建到大肠杆菌表达系统pET28a上，转化大肠杆菌BL21，得到成功表达；纯化后酶活力可达3890IU，活力提高了近20倍。重组酶酶学性质和出发菌株产酶性质基本一致；酶蛋白分子结构研究结果表明在热变性过程中，木聚糖酶分子的二级结构与三级结构均发生变化，并伴有疏水面暴露和分子间聚集现象，而酸碱变性时仅观察到三级结构的变化。
该课题组已在国内核心期刊发表论文6篇，发表专著1部。培养硕士生2名，学生8名。相关专家一致认为：作为木聚糖酶产生菌，类芽孢杆菌在国内还是首次报导，其酶学性质研究和酶的分子结构分析表明，此酶在工业化生产中将有很大的应用潜力，其研究手段和结果达到了国内领先水平。
