腺苷蛋氨酸在制药行业里可能并不为大家熟知,但它并不是什么新药,在国外最早被用于治疗抑郁症,而在国内主要用作治肝利胆药。除了它之外,大家可能更熟悉的利胆药就是熊去氧胆酸,目前在国内两者占了利胆药市场80%以上的份额,其中腺苷蛋氨酸2009年销售额达到3.5亿元以上。但随着全社会动物保护意识的增强和自然和谐观念日渐深入人心,来自熊胆的去氧胆酸将被禁用或替代。因此,在缺乏新药推出的背景下,再加上基本药物制度的出台,腺苷蛋氨酸市场的回暖和持续增长应该是意料之中的事了。
目前国内临床应用的腺苷蛋氨酸全部来自意大利Knoll制药/雅培公司,商品名为“思美泰”,剂型分为注射剂(粉针)和肠溶片剂,规格均为500mg。尽管其行政保护期于2004年10月10日就已终止,但至今国内仅有浙江海正一家获批生产该品种,而且是今年刚刚获得SFDA批准。
微生物发酵法是SAM工业化生产的主要方法,另外还有生物催化方法。专利CN1814774A公开了一种生物催化制备SAM的方法,生物催化剂为腺苷蛋氨酸合成酶,虽然该方法催化反应简单,但是生物催化剂的高效获得和如何保持其高活性和重复使用是个难题,还有许多关键技术需要克服;专利CN1824768A则公开了一种更为复杂的催化合成SAM的方法。因此,发酵法生产SAM仍将是主流。
发酵法生产SAM,目前主要使用重组毕赤酵母和酿酒酵母。通过对比可以发现,毕赤酵母发酵中要使用甲醇诱导,而且需严格控制甲醇的流加量,需不断检测发酵液中甲醇的含量,发酵液中甲醇含量的测定(无论在线还是离线)是件困难的事情,而且甲醇易燃易爆,对于大规模发酵来说存在风险。
在腺苷蛋氨酸发酵方面,有一些科研院所已经取得了很大进展,但距离大规模工业化生产还有一定距离。浙江工业大学郑裕国研究小组用气升生物反应器发酵SAM,水平为2.5g/l (王远山,2007),北京化工大学谭天伟等利用诱变方法筛选到SAM高产的酿酒酵母,通过酵母高密度发酵和L-蛋氨酸补加策略实现产量14.48g/l(王杰鹏,2008),是目前国内外报道的最高水平。除了科研院所,国内报道生产SAM的药企有浙江海正、山东齐都、北京双鹭和海南国栋等,其中山东齐都用的菌种是重组毕赤酵母,发酵水平约为3~4g/L,海南国栋药物研究所构建了含有两个载体的SAM高产工程菌,1000L发酵试验达到14~16g/L的发酵水平(专利CN1824768A),北京双鹭药业利用基因工程技术在酵母胞内高表达SAM合成酶,破壁后继续在体外合成SAM,产量能够达到12.8 g/L(专利CN101736048A)。
对于腺苷蛋氨酸的分离纯化,主要步骤为细胞收集;机械破碎或有机溶剂浸提;离子柱层析粗分;脱色浓缩后用有机溶剂结晶精制;最后干燥获得纯品。
上文是对目前国内腺苷蛋氨酸市场和技术的一些归纳小结,说到底,要想在市场中有能耐,那就得拼技术拼成本。