去甲金霉素发酵生产技术

一、概况从青霉素广泛使用以来，抗生素造已经成为人类抵抗病菌微生物的重要手段。但是由于抗生素的滥用，临床上病原菌的种类和药敏类型均发生了很大的变化，各种各样的抗性基因也出现的越来越频繁。耐甲氧西林葡萄球菌（MRSA），耐万古霉素和****拉宁的粪肠球菌等多重耐药性细菌的出现使得越来越多的抗生素失去效用。抗生素产业发展到今天，需要不断的开发新成员，以应对新的抗药性细菌的产生。去甲金霉素是链霉菌（Streptomyces aureofaciens）次生代谢产物，主要用于米诺环素和替加环素的生产原料。二、产品用途 1、直接作为医药原料 去甲金霉素 (Demethylchlortetracycline)，别名：地美环素、去甲基氯四环素、DMCT等。抗菌谱与金霉素相似，其特点是作用比四环素、土霉素强，比金霉素稳定。临床用于肺炎、尿路感染、淋病、细菌性痢疾、布氏杆菌病及小儿猩红热等。 2、用于合成米诺环素米诺环素为半合成的四环素类抗生素，最早由美国Lederle公司开发上市。盐酸米诺环素同其它四环素类抗生素一样，是通过影响细菌蛋白质的合成而产生抑菌作用的。其作用机理为：盐酸米诺环素能特异性地与核糖体30s亚基上的A位置结合，阻止氨基酰-tRNA在该位置上的联结，从而抑制肽链的增长和影响细菌或其它病原微生物的蛋白质合成。米诺环素对革兰氏阳性、阴性的球菌、杆菌、需氧菌及厌氧菌、螺旋体、立克次氏体、支原体、衣原体等均有较好的抗菌作用。在临床上主要用于四环素及青霉素类的耐药菌引起的感染，如泌尿系感染、呼吸系统及软组织感染、支气管炎、肺炎等。 3、用于合成替加环素替加环素属于新一类抗生素——甘氨酰四环素，其可以克服限制很多抗生素使用的两种主要耐药机制：外排泵和核糖体保护。如今惠氏公司的研究成果使其能作为一种对以下疾病患者的单一药物治疗手段：由革兰阴性和阳性致病菌、厌氧菌，由耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）导致的复杂性腹腔内感染、皮肤和皮肤组织感染。替加环素之所以受到如此大的关注，最重要的原因之一即是，它可有效地对抗耐药菌株，包括流行率正逐渐增加的MRSA感染。 4、用于合成PTK 0796 近两年来，默克公司和Paratek又开发了另一个四环素类抗生素BAY73-6944（PTK 0796），它抗菌谱广，具有抗耐药性、抗革兰阳性菌作用（包括MRSA、PRSP），与万古霉素相似，比利奈唑酮强，对VRE亦有作用，已进入II期临床试验。三、项目技术特点 1、发酵工艺国内外对有关去甲金霉素的生物合成相关酶及基因已有较多的研究报道，但有关去甲金霉素的菌种选育、发酵、提取及工艺研究报道较少。美国专利报道的去甲金霉素发酵单位为1200 mg/L。国内有关去甲金霉素的研究开发方面只有中国医医科院和杭州大学等几篇论文，发酵单位为4000mg/L。我单位经过近两年的研究开发，最终筛选出一株去甲金霉素高产菌株，发酵单位达到12000mg/L，为国内最高水平。 2、提取工艺国内采用的是传统的溶剂提取工艺，采用乙酸丁酯萃取，溶剂量消耗大（1：4），溶剂回收过程有损失，成本较高。我们采用柱层析纯化法，成本相对较低。 3、市场优势我国米诺环素获生产批文有数家，但目前没有原料供应，仍需要从印度进口。目前国内去甲金霉素生产只有一家生产。