点击图片查看原图
Polyfectine转染试剂
产品简介：
Polyfectine转染试剂是百恩维生物公司（Biowit Technologies）最新研发合成的新型纳米聚合物高效转染试剂，既可以转染分裂细胞也可以转染非分裂细胞。由于纳米技术的应用，Polyfectine在细胞转染过程中，表现了卓越的低毒、高效的性能，可用于悬浮细胞（如293-F、CHO-S等）的转染，更可用于In vivo动物体内的高效转染。
产品货号：PL0001
运输与储存：常温运输，储存于4℃，有效期12个月
贴壁细胞操作步骤：（以6孔板为例）
1. 在转染前一天按每孔3～5×105个细胞接种细胞。
2. 转染复合物的制备：
⑴ 取4μg DNA 用250μl无血清稀释培养基（建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或RPMI1640）稀释，充分混匀，制成DNA稀释液。
⑵ 取4～8μl Polyfectine加入到DNA稀释液中，充分混匀，室温静置15分钟。
3. 转染 ：
将转染复合物加入到含有细胞和完全培养基的6孔板中，轻柔混匀,培养4～6小时后更换培养基，于37℃ ，5% CO2培养箱中继续培养24～48h。
表格：不同细胞培养容器转染用量
|
细胞培养容器
|
细胞培养面积
|
需要培养基的量
|
稀释用培养基的量
|
DNA转染
|
RNAi转染
|
||
|
DNA
|
Polyfectine
|
RNA
|
Polyfectine
|
||||
|
96孔板
|
0.3cm2
|
100ul
|
25ul
|
0.2ug
|
0.2～0.4ul
|
5pmol
|
0.1～0.2ul
|
|
24孔板
|
2cm2
|
500ul
|
50ul
|
0.8ug
|
0.8～1.6ul
|
20pmol
|
0.4～0.8ul
|
|
12孔板
|
4cm2
|
1ml
|
100ul
|
1.6ug
|
1.6～3.2ul
|
40pmol
|
0.8～1.6ul
|
|
6孔板
|
10cm2
|
2ml
|
250ul
|
4.0ug
|
4.0～8.0ul
|
100pmol
|
2.0～4.0ul
|
|
60mm平皿
|
20cm2
|
5ml
|
0.5ml
|
8.0ug
|
8.0～16ul
|
200pmol
|
4.0～8.0ul
|
|
100mm平皿
|
60cm2
|
15ml
|
1.5ml
|
24ug
|
24～48ul
|
600pmol
|
12～24ul
|
悬浮细胞操作步骤：（以50ml培养液为例）
1. 在转染前一天按6～7×105个细胞/ml接种细胞，待转染时细胞密度应在1×106个细胞/ml。
2. 转染复合物的制备：
⑴ 取50μg DNA 用2ml无血清完全培养基稀释，充分混匀，制成DNA稀释液。
⑵ 取50～100μl Polyfectine加入到DNA稀释液中，充分混匀，室温静置15分钟。
3. 转染 ：
将转染复合物加入到含有48ml细胞和无血清完全培养基的125ml细胞培养摇瓶中，轻柔充分混匀，125rpm，37℃ ，8% CO2细胞培养摇床中继续培养24～96h。
产品用于：
仅供研究使用，不适用于人或动物的体外诊断与治疗。
