1． 用有机酸发酵生成黄原胶
将野油菜黄单胞菌(甘蓝黑腐病单胞菌)NRRL B～ l459种入含葡萄糖20、柠檬
酸(一水)2．19、硫酸铵2、磷酸二氢钾5、硫酸镁(七水)0．2、二氯化钙0．002、氧
化锌0．006、二氯化铁(六水)0．0024、硼酸0．006、丙酸酮钠20g／l和盐酸0．13 ml／l的
培养液中，25℃振荡4天。黄原胶产量11．8g／kg，而未加有机酸者为8．9g／kg。
2．黄原胶产率的提高
用黄单胞菌发酵时，加入脱氧胆酸盐可提高黄原胶的产量。即将预培养的野油菜黄
单胞菌种入含葡萄糖22500、柠檬酸盐500、氯化铵856、脱氧胆酸钠500ppm和无机盐类
的培养液中，28℃搅拌4天。黄原胶产率为1．O7 ，而不加脱氧胆酸盐者为0．72％。
3．连续发酵提高黄原胶的单位产率
将野油菜黄单胞菌NRRL B— l459连续生长在氮浓(氯化铵)为0．036％的培养液
中，发酵完成后， 发酵液中的平均细胞浓度为2．13g干重／l，单位产率为0．14g黄原胶／g
细胞·h。如加入谷氨酸盐使氮浓增至0．056％， 在稳态时的细胞浓度增至4．2g／l，黄原
胶的单位产率增加至0．17"--0．18g／g细胞·h。
4．用野油菜黄单胞菌ATCC31601半连续法生成黄原胶
将预培养的野油菜黄单胞菌种入营养培养液中， 于28℃搅拌(250rpm)18~20h。取
出10ml起子培养液种入9O ml相同组成的新培养液中培育24h， 以后均反复周期性地按
此办理。这样连续转移1O次以上， 黄原胶的产量不会减低。
5．野油菜黄单胞菌31 601
将预培养的ATCC31601菌种入3LpH6．0、含葡萄糖2．25， 氯化铵0．085、柠檬酸盐
0．05、酵母膏0．04％和无机盐类的培养液中，29℃搅拌通气325h。黄原胶的产率为
0．25g／g细胞·h。
6．用野油菜黄单胞菌半连续发酵法生成黄愿胶
将野油菜黄单胞菌XCP一1种入含葡萄糖22．5、磷酸二氢钾3．6、磷酸氢二钠3．4、柠
檬酸0．5、氯化铵0．86、硫酸镁(七水)0．421、氯化钙(二水)0．04、氯化钠0．02lg／1和
无机元素的培养液中，28℃振荡18-x,20h。取出10 ml加至90 ml新制培养液中， 连续如
上培育24h。每天均按上法取出10％种菌液加至新制培养液中， 连续l4天， 黄原胶产率
达3．2，、一6．4g／1。
7．用乳剂发酵生成黄愿胶
将野油菜黄单胞菌种入llL含葡萄糖375、酵母膏44、磷酸氢二铵儿、磷酸氢二钾ll
和硫酸镁1．1g的培养液中， 快速搅拌48h。然后取出5L发酵液， 加300 ml营养液(188g
葡萄糖和22g酵母膏的水溶液)和4L矿物油，继续发酵72h。此时黄原胶产率4．1 mi／100l
(包含在48h的取出量)， 粘度3200cp。4 黄原胶的水溶液粘度为1000Ocp。
8．发酵法生成黄愿胶的接种量
用野油菜黄单胞菌生成黄原胶的生产培养基的接种拭为培养液壁的0．01％～0．5％，
同时还要控制生产培养基中的铁、锰和锌的含量。即铁≤10ppm，锌≤ 3 ppm，铁和锰
的比为40：l，、一2 ：l。如在含葡萄糖60、柠檬酸盐l、氢氧化钙0．05、氢氧化镁
0．0775、硫酸镁(七水)0．058、磷酸氢二铵3、磷酸氢二钾l g／]、醋酸0．45 m1、硫
酸锰(一水)0．83、硫酸锌(七水)1．42、硫酸铜(五水)0．25、硫酸钻(七水)0．28、
硼酸0．06和硫酸亚铁(七水)35．6m]／i的2l发酵液中， 种入0．0l 菌种(该菌种生长在
含麦芽浸膏一葡萄糖一胨的培养液内)，发酵106h后，发酵液的浑浊度相当于细
胞2g／1。
9．丙酮酸盐含量低的黄原胶
将野油菜黄单胞菌ATCC13591种入pH7．0、含葡萄糖67、柠檬酸盐0．6、氢氧化钙
0．025、硫酸镁(七水)0．02、磷酸二氢钾0．5、磷酸氢二铵2．7．、酵母膏0．2g／l和硫酸
亚铁(七水)36ppm的培养液中， 于30℃连续搅拌发酪， 稀释 钲0．5／h。发酵液粘度
51200cp，含沉淀物3og／l，丙酮酸盐0．3％。
1O．利用化学特定培养液生成黄原胶
将黄单胞菌在限量营养物生长条件下生成黄原胶。即将培养的野油菜黄单胞菌B一
1459生长在迪夫科酵母碳培养基内间歇发酵， 直到细胞浓度达3．2g／l。 ：稀释率为
0．06／h， 即开始连续操作146h，培养液浓度增加50％， 至240h加入0．21％ L一谷氨酸。
至453h换用含磷酸二氢钾0．88、硫酸钾0．54、硫酸镁(七水)0．4l、 __氯化钙(二水)
0．056、柠檬酸0．167、氯化铵1．53、谷氨酸2．1、葡萄糖税．5g／i、三氯化铁10．!rag／ I
和痕量元素的培养液，至501h发酵结束。黄原胶产率最高0．83，最低0．24g／1·h，速率
0．63g／1·h。
11．低粘度黄愿胶
用黄单胞菌属发酵加入硫酸盐， 可生成低粘度黄原胶。野油菜黄单胞菌种是用YM培养基及各不同的化合物(包括硫酸盐)制取的。培育温度28℃， 时间18h。将此种菌
种入含葡萄糖28g、L一组氨酸盐酸盐1、DL-蛋氨酸2和DL-色氨酸2 mg／1，再加入维
生素和无机盐类的培养液中，28℃振荡4天。黄原胶浓度为0．9％一1．5 o／o。种菌用含硫
酸盐的培养基者，生成的黄原胶粘度较低。
12．用桃李黄单胞菌或其变异体生成黄原胶
将桃李黄单胞菌OKioo191在pH6．5～7．5发酵可生成黄原胶。碳源为蔗糖、葡萄
糖、水解淀粉和(或)果糖。氮源为玉米浆、大豆浸出液和(或)动物蛋白质。用5％
葡萄糖和1．6％玉米浆者， 黄原胶产率3． ％。
13． 黄原胶
(1)将野油菜黄单胞菌NRRL B-1459培养在含葡萄糖2O、磷酸二氢钾5、硫酸
镁(七水)0．2、尿素2．7g／1和0．5％富马酸钠的100ml培养液中，28℃ 振荡95h。将发
酵液用水稀释三倍， 离心分离。清液与3 g氯化钾和400 ml甲醇混合，以沉淀出黄原胶，
用100ml甲醇洗涤沉淀物，用真空干燥。此胶1％溶液的粘度为4420cp。产量l2．7lg／i,
而不加富马酸钠的对照样品， 其1％溶液的粘度为1310cp， 产量11．3g／1。
(2 )以黄单胞菌类发酵，用生长调节剂来控制生长和产品的生成。即将预培养的
恭菜黄单胞菌种入含葡萄糖1、磷酸二氢钾0．05、硫酸铵0．02、硫酸镁(七水)0．0l％
和痕量元素的培养液中，28℃ 搅拌通气， 直到光密度在540纳米为4，而后在培养液中
增补至含葡萄糖5、磷酸二氢钾0．5和硫酸铵6．2％、鹅肌肽0．2g／1。约3— 4 h， 光密
度达6时，加入L一甲基组胺0．0005g， 直到细胞生长停止， 产品开始生成。60h后搅拌速
度增加至1000 rpm。黄原胶浓度达4．7％， 产率为葡萄糖的94％。
(3 )将野油菜黄单胞菌ATCC13951培养在含59g葡萄糖源、硫酸锰(四水)工．1、
硫酸锌(七水)1．42、硫酸铜(五水)0．25、硫酸钴(七水)0．28、硼酸0．06和硫酸亚
铁(七水)35．6m~／1的一定培养液中。24h后， 以0．04／h稀释， 稳定保持三天后， 加入
异丙醇以沉淀胶质， 其产量和流变特性均优于含痕量元素高的黄原胶。
14．用黄单胞菌属连续生产黄原胶
采喝延长稳惫法， 将野油菜黄单胞菌N RRL B—l499种入2 L含葡萄糖l8、硫酸铵
1．8、磷酸二氢钾0．4、柠檬酸1、硫酸镁(七水)0．2、硫酸锰(一水)0．06、硫酸亚
铁(七水)0．0g和二氯化钙(二水)0．2g／l的培养液中，30℃搅拌通气48h，然后每小
时加料85g，逐步增加至每小时100g，直到207h保持稳定状态，胶液浓度为7．8g／1。然后
进料增加至25％， 达到第二次稳定状态， 并保持到337h。此时的胶液浓度达8．5g／h。
15． 两步发酵生成黄原胶
将野油菜黄单胞菌培养在含葡萄糖2、胨2和酵母膏0．5％的10L培养液中30℃、
36h。另一发酵器则装入含葡萄赫4．7、磷酸二氢钾0．5和硫酸镁0．1％的180L培养液，再
加入第一次发酵液30℃通气84h，得3．5％黄原胶l而一步法则需lo8h。第一步为细菌
细胞的生长阶段，第二步为生胶阶段。
二、黄原胶发酵液的处理及分离
1． 用与季铵盐络合方法， 可以从野油菜单胞菌发酵液中分离黄原胶
通过用季铵盐CATB和"Catavlon 分离以上发酵液中黄原胶方法的比较，证明
前者是更有效的络合剂。尽管二者均需足够的化学计算量才能提高多糖的回收率，但在
沉淀黄原胶后的清液中，CATB的残存量只有1．7 l而"Catavlon"则残留15 。在
此法中黄原胶与季铵盐的2一丙醇液起络合作用而沉淀出来。浓缩2一丙醇洗液可回收季铵
盐。
2． 黄原胶的沉淀方法
在黄原胶的发酵液中加入二价阳离子和一种有机溶剂，可沉淀出黄原胶。即在黄原
胶的发酵液中加入异丙醇至30％浓度和硝酸钙至0．2M，经加热处理后，发酵液中生成
硬的黄原胶沉淀物。
3． 黄原胶溶液的处理
改善黄原胶发酵液过滤性能的方法是将发酵好的发酵液加热至60℃，调pH为5．5，
加入含酸性蛋白酶和B一葡聚糖酶的商品酶制剂，混合1 h。将发酵液中和并冷至<30℃，
调pH>11．5。在中和和过滤前保持1 h， 其过滤性能较之未经处理者大大提高。
4．从发酵液中回收黄原胶
(1)将黄单胞菌属发酵液用超滤法脱盐，浓缩后干燥， 即得黄原胶产品。将野浊
菜黄单胞菌IFO18551培育在18L含葡萄糖4、胨0．4、磷酸氢二钾0．5和硫酸镁(七水)
0
．1 的培养液中30℃24天。发酵液用超滤膜过滤脱盐， 得总盐1％ 。滤液经喷雾干
燥， 产黄原胶130g。
(2 )将用野油菜黄单胞菌生成黄原胶的发酵液， 用含聚乙二醇和硫酸铵或磷酸
钾、硫酸铝等的两相水溶液处理，使黄原胶在底层沉淀， 而微生物细胞则保留在上层液
中。即将1 L含黄原胶2％的发酵液倾入10L含聚乙二醇(分子量3000)和13． ％硫酸铵
的水溶液中， 取出底层经离心分离后， 得黄原胶l9．6g。
(3 )将含黄原胶的发酵液， 用离心分离、浓缩和超滤法，清液以含二氯化钙的甲
醇或丙醇的水溶液沉淀，可获得过滤性能良好的黄原胶。即将由野油菜黄单胞菌生成含
黄原胶2．5％的发酵液4 L，用水稀释至20L此而后离心分离， 并用超滤法浓缩。用，含
胶约2．5％ 的浓缩液100ml，以含甲醇和l ，6二氯化钙液[35：65(v)]的60ml溶液处理，
并调pH至12"--12．5， 获得纤维状黄原胶， 其过滤性能良好。
5． 微生物法生成黄原胶及其处理
在含葡萄糖2．5％、酵母膏、无机盐类和0．00l％泛酸的杀菌培养液中， 种入野油菜
黄单胞菌IFO13551，于28℃振荡培养96h。将发酵液稀释后离心分离，以除去微生物，
然后加饱和氯化钾液使黄原胶沉淀。沉淀物用乙醇和丙酮洗涤， 经空气干燥后，50m1发
酵液可获得0．98g纤维状白色结晶胶体。这种1．8％黄原胶液具有加纳耳G1颜色。要获得
标准黄原胶， 还必须进行少量脱色。
三、黄原胶的应用
'．黄康饺与甘油闱柞★昌保沮嗣
甘油用作食品保湿前耐，其流动性可将其与黄原胶和丙二博混合以控镧。
2．黄原胶提高食用乳剂的质量
在水包油型酸性乳剂中，加入黄募胶和乳清蛋囟痰，其口感和稳定性显著提高。
3．黄屎胶提矗乳羽的慧定性
在水包油乳剂中，加入黄原胶和罗望子胶，可提高乳剂韵稳定性。
4． 黄原胶用作面包翻节钢
在面包、干面条、蛋卷皮和其它面闺中， 加入黄原胶(< 2％)和多元醇(< l％)，
产品的弹性增加，且感观得分也高。
5． 黄原胶用作免疫辅药和肿瘤抑制剂
用老鼠作试验，每天每公斤饲以黄原胶12．5、25．O和50mg 9天，可推迟欧和希腹
水舯瘤增长，存活期>100％ 。
6．羹原胶 古尔胶釉角直胶穹作装■ 汤的增稠嗣
黄原胶与角豆胶在55"--59℃不能用来制汤，而古尔胶和黄原胶的增稠 性是协同作
用，而不是生成胶体。黄原胶在添加牛奶的食汤中，经常使牛奶蛋白质生成凝块。
7． 黄原胶用作饲科露抽翻和动物饮用水
在美国联邦的食品、药物和化妆品条例中，规定黄原胶可作为动物饲料稳定剂， 乳
剂、增稠剂、悬浮剂或艟础刹。在牛犊乳中的最高添加量为0．1％。反刍动物液体饲料
中的添加量为0．25％
8． 黄原胶用于糖类发酵中生产多元醇
糖类发酵的培养液中加入黄原胶，可生成券藓醇|(丁囱博)和核糖醇。发酵液中生
成的赤藓醇浓度和细胞数分别为9．2 ~H520×10。／mlI而未加黄原胶的对照样品分别为
1o5 和30×lO‘／M 。
9． 黄愿胶可提高裔浓度盐类乳粥曲稳定性
在水包油的食品乳剂I{I， 水榭含氯化钠5％"--30％， 如加入黄原胶和．(或)角豆夹
胶0．05％一l％至水相qj，能妊并地提高乳荆的贮藏稳定性。
1O． 黄原胶嫩化食用肉嶷
用含硝酸钠、聚磷酸钠、盐和0．3黄原胶的腌制盐水， 按重量的15％注入猪腿中，
并用盐和硝酸钠液覆盖保持三灭， 烹煮前沥干12h。制出的猪腿较之未加黄原胶的对
照样品的肉质殳嫩， 熟重更高。
11． 黄原胶和胍尔豆胶可稳定两相色拉调味料
一种含有油和水的两栩色拉调昧料，水棚含黄原胶0．08"--0．2和瓤_尔豆骏|o．1％，、一
0．3 0／(匝)。此溯味料只要振摇一次， n『k期保持均匀。这种调味料的组成为：水福
仑醋17．0、水68．98、糖5．0、盐6．5、谷氨酸钠0．2，黄原胶0．12、胍尔豆艘e 2和香料
2．0％ (重)， 油相含大豆色拉油100％ (重)。
12． 含，t愿胶的凝暴系统
用格兰胶、黄原胶和半乳甘露聚糖和(或)葡糖甘露聚糖生成的凝聚物， 可用作饲
料或食品。如将药翦胶和黄原胶各0．45％浓度，加pH为6．1的磷酸盐缓冲液，煮沸
15rain以溶解，装罐杀菌，然后冷却。这种胶的断裂强度为253g，弹性9．5ram。
1S．冀屎肢溶液用于冷冻面团的保藏
将冷冻面团用含黄原胶的溶液涂被， 可保持面团的组织结构、颜色和稠度。如用
1％黄原胶溶液喷射在冷冻面团上，在0。F面团的颜色和稠度可保持9周。
14．含黄原胶的多层果冻
将黄原胶加至果冻中， 可制成多层果冻。如果冻的一层含卡那胶1．5、黄原胶0．02、
糖浆28．0、葡萄香料0．01、着色剂0．01和水70．46kg。另制出几层除含糖量不同外，其
余组分均类似。依次将一层放在另一层上面， 各层的组成分不会改变。
15． 冀愿胶舟酶固定化
将含黄原胶(或其衍生物)和一种酶的混合物，与≥三价的金属离子混合，可获得
一种不溶于水的黄原胶盐的固定化酶。此产品对热、各种盐类和高、低pH均高度稳定。
即将含5 g黄原胶的20Oral水溶液， 与含3 g脂肪酶的lOml水混合。以此混合物滴加至
Oo5％三氯化铁溶液中，可获得球形的固定化脂肪酶。
