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谷氨酸发酵液除菌体提取谷氨酸研究进展

   日期:2013-02-02     来源:发酵科技通讯编辑部    作者:周秀琴    浏览:1686    评论:0    
核心提示:我国味精生产, 从发酵液中提取谷氨酸大多采用带菌体冷冻等电加离交法, 由于发酵液中存在大量的菌体蛋白、悬浮物及其它杂质,给
  

我国味精生产, 从发酵液中提取谷氨酸大多
采用带菌体冷冻等电加离交法, 由于发酵液中存
在大量的菌体蛋白、悬浮物及其它杂质,给谷氨酸
提取操作、提取收率、谷氨酸质量带来显著影响,
且废水含高 COD、 高 BOD 等严重污染环境的物
质,又给废水治理带来重重困难。
近几年来,国内一些味精生产企业、研究所,对
谷氨酸发酵液除菌体及提取谷氨酸进行了大量研
究,除菌体工艺有高速离心机分离,絮凝剂分离、膜
分离等,都取得了明显成果。按除菌体不同工艺、除
菌体率分别达到 70%~96%, 以膜分离法除菌率最
高达 95%以上,得到的发酵液澄清,OD 低,谷氨酸
提取操作方便,由于除去了影响谷氨酸结晶的大量
杂质,因而谷氨酸结晶颗粒大,纯度高、质量好,易
于沉降分离,提取收率明显提高。 高纯度谷氨酸有
利于味精精制,味精中和脱色过滤可降低活性碳或
树脂用量,提高味精结晶质量,大大降低味精生产
成本。 除菌体后的发酵液及等电提取后的废液中
COD、BOD 大大减少,减轻了环境污染,降低了废
水治理负荷与难度。得到的菌体经干燥后可以综合
利用,作高蛋白质饲料或作核苷酸的生产原料。
谷氨酸发酵液除菌体及多种新工艺提取谷氨
酸的研究, 是对我国味精工业清洁生产的有益探
索。随着研究的不断深化,许多先进工艺技术将会
被应用,味精生产终将进入一个新水平。
1
高速离心分离除菌体

浓缩等电提取
沈阳味精厂从瑞典引进 4 台 ALFA-LAVA 公
司的 FESX512S-31C 型蝶片式高速喷咀离心机,
转速 4650rpm/分,功率 45kw,对玉米淀糖为碳源,
尿素作氨源、 玉米浆为生物素的 T-613 菌发酵液
进行了工业性除菌体, 进料量 20m
3
/h, 喷咀直径
1.0mm,菌体分离率达 70%以上,轻流占 75%,重流占 25%左右,除菌体后发酵液中谷氨酸略增,还
原糖下降,OD 值明显降低,工业规模运转证明,该
设备对分离谷氨酸发酵液性能可靠,比较适宜。
发酵液除菌体后采用浓缩等电点提取法。
工艺路线:

 

 

除菌体后的发酵液, 经减压蒸发到含谷氨酸
12%~15%,后与重液经水解浓缩制成的二次蒸发
液进行等电中和(60℃、40rpm 搅拌),然后冷却、
沉淀、离心分离,提取达 83.14%~85.03%,比带菌
体浓缩等电点提取收率 77.24%显著增加。 且谷氨
酸含量高达 96%(干),用于制造味精时脱色液过
滤快,透光率高,味精质量好。
2
凝聚剂除菌体一次等电或浓缩等电提取
使用安全性高的壳聚糖作絮凝剂, 其阳离子
性能与发酵液中菌体(带负电荷)与蛋白凝聚使其沉淀而进行分离。
壳聚糖对金属离子、蛋白质、氨基酸、核酸均有
很强的吸附能力,特别对胶体微粒有甚大的絮凝作
用,其官能基团主要是氨基。在最佳 pH、搅拌速度、
用量、温度条件下,菌体去除率可达 90%左右。
壳聚糖不易溶于水,而溶解于酸性溶液中。 配
成一定浓度后,于发酵液中慢慢加入,搅拌速度也
以慢为好。过快易将凝絮物打碎,难过滤。菌体凝聚
沉降后,抽取上清液,沉降物可加硅藻土或珍珠岩
作助滤剂,尤以硅藻土作助滤剂好,不吸附谷氨酸。
中试规模过滤可用板框压滤, 小试规模实验室中,
采用高速离心机分离。应用国产高速离心机分离除
菌体凝絮物(包括菌体)至今未见报导,这也是用凝
絮法除菌体不能很快推广的一个较大问题。凝聚法
去除菌体后的谷氨酸发酵液的提取方法有:
2.1 一次等电点法
谷氨酸发酵液经絮凝处理后, 采用一次等电
点法,(即用酸逐步调到 pH3.2 法) 提取收率可达
76.18%,比对照收率 71.3%提高 6.2%,谷氨酸结
晶的透光率 52.25%,比对照 11.25%提高了 4 倍;
谷氨酸提取后的母液, 可减少谷氨酸 0.06%~
0.11%。 这是提高谷氨酸收率的一个重要原因,即
去除了干扰谷氨酸结晶因素。
2.2 浓缩等电点法
将除菌体经过滤的发酵液,真空浓缩一倍,用
加热快速调 pH 的方法, 一次性直接调到 pH3.2。
搅拌到常温,再搅拌 2h~3h 时,沉淀 3h,离心分离
谷氨酸, 谷氨酸一次收率平均可达 85%左右,纯
度可达 95%左右, 且调节 pH 的酸用量比普通谷
氨酸等电点法用量要少。
2.3 先等电提取后浓缩再提取法
谷氨酸发酵液除菌体后,先用一次等电点法(常
温或冷冻)提取出谷氨酸的 60%~75%,残母液中含
1.2%~1.5%左右的残谷氨酸,再加以浓缩(通过多效
蒸发器)3 倍,再提出剩余谷氨酸,总收率可达 85%
以上。 母液浓缩成浆状可作肥料,再根据当地的土质
情况,适当添加磷、钾等肥效成分。 这条工艺路线是
既提高了谷氨酸的提取收率,又产生综合效益。
从发酵液分离出的菌体经干燥作高蛋白饲料。
3
膜分离法除菌体提取谷氨酸
膜分离技术是国际公认最有发展前途的高效
分离技术, 利用膜对混合物中各组分的选择通透性分离、提纯和浓缩目的产物。膜分离过程在常温
下进行,无相变化,能耗低、设备简单,操作控制方
便,利用膜分离技术与提取谷氨酸工艺技术(包括
新工艺提取)结合,提高谷氨酸产量、质量、味精质
量,降低生产成本与节能减排等综合效益更显著,
更符合清洁工艺生产。
3.1 超滤除菌体提取谷氨酸
谷氨酸发酵液中的谷氨酸菌体大小约在
0.3~3μm,带有很强的亲水性。 具有 μn 级孔径的
超滤膜在分离谷氨酸菌体有独特优势。
3.1.1 Ulttra-f10 超滤膜系统除菌体等电提取谷氨酸
福州富成味精食品公司中型试验用 ultr-
craf10 超滤膜分离菌体后进行等电提取, 其工艺
流程图如下所示。

 

 

试验用发酵液进料量 630kg, 操作 ultra-f10
系统进口压力 5.5Bar 膜通量 3.35kg/s 膜过滤后渣
的加水量 250kg,得到滤渣 40kg
试验结果, 超滤去除了菌体及大部分可溶性
蛋白等大分子物质,去除率达 98%,发酵液质量
大大提高,OD 从 0.88 降到 0.015, 谷氨酸提取收
率达 91%以上(不包括滤渣回收的谷氨酸)。 谷氨
酸纯度及味精质量大幅提高,味精精制收率提高,
精制成本下降。
试验还表明该膜除菌体整个过程膜通量很
高,耗时短、运行平稳,分离效果好,收率高,操作
较易,设备安全可靠,工艺效率高,值得推广应用。
3.1.2 陶瓷膜分离菌体提取谷氨酸
陶瓷膜是无机材料, 有 pH 对膜通量影响较
小,发酵液或等电母液除菌时一般不用调节,适当
提高温度可提高膜通量等优点。
王焕章等利用无机 0.2μm 的 ZrO
2
陶瓷膜除
去发酵液中的菌体,除菌率达 100%。
徐昌洪等试验将陶瓷超滤膜除发酵液菌体
后,用浓硫酸水解残留液,过滤水解液,与超滤后
的发酵液进行谷氨酸提取, 还采用味精结晶母液
纯化谷氨酸结晶。 该工艺采用蒸发与冷却耦合连

续结晶技术,摒弃离子交换工艺,为谷氨酸清洁生
产探索出新途径。
广州奥桑味精食品有限公司采用陶瓷膜超滤
与浓缩连续等电技术相结合,成功应用于大生产,
该工艺有产品收率较高、生产周期缩短,副产品质
量高等优点,取得了明显经济与社会效益,又符合
国家提倡的清洁生产。
3.1.3 中空纤维微孔滤膜 (PVDF)分离菌体提取
谷氨酸
武汉味全食品有限公司研究, 采用聚偏氧乙
烯中空纤维孔滤膜(PVDF)分离发酵液菌体,提取
谷氨酸工艺。
工艺流程为:

 

 

试验发酵液量 900L。
根据谷氨酸发酵液的料液组成, 设计了内压
中空纤维膜装置 TWF 双向流工艺流程。将发酵液
以 20min 为周期进行倒向, 即发酵液流向按通常
的下进上出方式运行 20min 后,通过阀门切换,将
发酵液流向反转为上进下出方式, 运行 20min 后
再次换回, 依此循环进行、 膜装置进口压力为
0.1MPa、出口压力为 0.0MPa。
该工艺特点是同一支中空纤维膜组件在过滤
工作过程中,同时处于工作与清洗状态,从而保持
膜的高分离功效。 该工艺尤其适用于发酵液等较
粘稠液体的过滤与精制, 改变了以往中空纤维膜
不能用于浓粘液体的过滤分离的情况, 拓展了中
空纤维膜的应用领域。与板式膜和管式膜相比,中
空纤维膜装置具有设备占地少、造价低、浓缩液回
收率高等优点,尤其适用于大型发酵液的处理。
试验结果,发酵液除菌体率达 100%,分离效
果高,除菌体后的发酵液杂质少,粘度低,采用高
效浓缩 3~4 倍后再进行连续低温等电提取谷氨
酸,等电提取收率 93%~94%;等电母液中谷氨酸
含量低,不需再进行离子交换;提取工艺酸碱用量
(比等电离交工艺)节省 1/3;生产周期缩短;生产
设备减少;工艺简化,谷氨酸收率,质量提高,利于
味精精制,整体降低味精生产成本,也因废水排放

 

 

量大大减少,降低治污成本。
采用内压式聚偏氟乙烯中空纤维膜去除发酵
液菌体,真空浓缩连续低温等电法提取谷氨酸工艺
有明显效果,随着研究深入,可望应用于大生产中。
3.2 纳滤膜除菌体浓缩等电提取谷氨酸
纳滤(NF)是在反渗透基础上发展起来的重
要高效节能新型技术,通过膜分离在压差推动下,
除去谷氨酸发酵液中菌体及大粒子物质, 有提高
产品收率、质量,节能耗、降污染等效果,提高经济
效益,达到清洁生产。
德州华茂生物科技有限公司进行实验室试验
纳滤膜除发酵液菌体、浓缩等电提取谷氨酸工艺,
流程如下图示:
膜分离菌体工艺流程:

 

 


试验采用 Ф4 类寸卷式膜组件形式,8 个膜组
件 4 排并联、两个膜组件串联,高压泵流量 12.0m
3
/
h,P=2.0MPa,每批处理 10m
3
谷氨酸。膜技术采用错
流过滤,水流动平行于过滤表面,在过滤表面形成
较大剪切力, 可使阻塞膜物质始终处于悬浮状态,
减少微粒、溶质在膜面沉积,即减少膜污染,提高膜
使用寿命,比微滤膜工艺技术先进,膜处理周期与
更换周期均能延长 25%, 谷氨酸提取收率高达
94%, 质量提高, 发酵液中的 COD 含量降低到
1000mg/L 以下, 废水处理负荷及治理成本大大降
低,这是又一种清洁工艺的探索。
主要参考资料
1.发酵液除菌体提取谷氨酸.周秀琴,中国调味品 1992-3,8~11
2.谷氨酸发酵液超滤膜分离.姜红仙 ,发酵科技通讯 ,32 卷-
4,3~5
3.超滤膜技术在谷氨酸生产中研究进展.林永贤等.发酵科技
通讯,37 卷-4,38~39
4.味精闭环生产新工艺.徐昌兴.精细与专用化学品,2007-15,B-14
5.陶瓷膜在谷氨酸发酵除菌体过程中的应用 发酵科技通讯,
31 卷-1,14~17
6.中空纤维微孔滤膜(PVDF)在味精生产中应用王大春等.发
酵科技通讯,33 卷-1,40~41
7.纳滤膜技术研究与应用探讨.李环江等.发酵科技通讯 36 卷-
4,7~8
    谷氨酸发酵液除菌体提取谷氨酸研究进展.pdf

 

 
 
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