安丝菌素(又名安莎霉素)是一类微生物来源的美登木素生物碱，其组分有P-0、P-1、P-2、P-3、P-3'、P-4 和P-4'，其中安丝菌素P-3(AP-3，1)为主要发酵产物，其通过阻碍微管形成从而阻止细胞的有丝分裂使细胞死亡，在体外及荷瘤动物中具有显著抗肿瘤作用。由于其细胞毒性强，安丝菌素的衍生物美登木素生物碱可以作为“弹头”与单抗结合形成免疫交联物，目前单抗C242与美登木素生物碱结合免疫交联物用于治疗实体瘤正在进行临床研究。下面就国内外安丝菌素发酵生产技术介绍如下：
上海医院工业研究院[1]利用珍贵橙色束丝放线菌SIPI-3-21 生产安丝菌素P-3，在含葡萄糖20.0 g/L、玉米淀粉30.0 g/L、棉籽饼粉30.0 g/L、CaCl2 10.0 g/L 和CaCO3 5.0 g/L 的发酵培养基中发酵培养，添加异丁醇54 mmol/L ，AP-3 的产量为307.8 mg/L，发酵液中AP-3 的含量达到86.5％。
免疫基因公司[2]于2005.12.12申请的中国专利CN101103120公开了一种大规模液体发酵高产安丝菌素技术，采用珍贵橙色束丝放线菌突变株PF4-4(ATCC PTA-3921)作为发酵菌株，以糊精5%（w/v），麦芽糖2%，Proflo 2.5%，CSP 0.5% ，CaCO3 0.5%，FeSO4.7H2O 0.0002%，CoCl2.6H2O 0.0005%，SAG471 0.04%和异丁醇0.3%作为培养基，采用分批补料工艺（900L），即在初始0-48小时内，以0.39mL/L/h的速率注入28.5%葡萄糖水溶液；在48h到288h的发酵期间，改成以0.51mL/L/h的速率注入包含21.5%葡萄糖、7.1% Proflo和7.1%异丁醇的储备液，经过13天的液体培养，发酵液中安丝菌素滴度达到304mg/L。专利文献还公开了制备精制安丝菌素的工艺，先通过热灭活或化学灭活培养液中微生物，用不相溶于水的非芳香族溶剂从培养基中萃取安丝菌素、析晶或先析晶再在硅胶或氧化铝上吸附层析。
四川大学[3]于2009.12.30申请的中国专利CN101928291A公开了一种从珍贵橙色束丝放线菌粗提物中分离纯化两种安丝菌素（P-2，p-3）的方法，采用逆流色谱法，其溶剂体系由体积比范围为a∶b∶c∶d＝1～0.4∶1∶1～0.4∶1的四种组分构成；其中a组分为正己烷或环己烷；b组分为乙酸乙酯或乙酸正丁酯；c组分为甲醇或乙醇；d组分为水。
上海交通大学[4-6]于2008.7.17申请的中国专利CN101319241公开了一种安丝菌素的固体发酵方法，该方法包括如下步骤：第一步，种子培养：将在蔗糖溶液中冷冻保存的产安丝菌素的菌体划线培养基平板，28℃下倒置活化2－9天后转移至种子培养基中，28℃下培养该种子液；第二步，固体发酵：将第一步中得到的种子液稀释至102－106CFU/ml的浓度涂布到铺有可再生纤维素薄膜支持物的发酵培养基平板上，28℃下培养7－10天。其于2010.8.30申请的中国专利CN101914587公开了基于异丁醇的安丝菌素生产技术。利用野生型珍贵橙色束丝放线菌ATCC 31565，在含酵母提取物1%，玉米煮沸滤液1%，葡萄糖0.5%，甘油4%，碳酸钙0.5%，磷酸氢二钾0.05%，七水合硫酸亚铁0.0002%和异丁醇36mM液体培养液中培养4-6天，AP-3产量达到93.8mg/L。其于2010.09.07申请的中国专利公开了安丝菌素发酵产量提高方法，通过采用甘油融化接种于种子培养基并进行培养操作，并经二次培养后得到二级种子，然后通过对二级种子进行摇瓶培养并将浓度为1M的硫酸镁水溶液添加至发酵摇瓶中进行发酵处理，然后将发酵摇瓶经摇床培养后实现发酵生产。
SmithKline Beecham plc[7]于2001.4.9申请的美国专利US6573074公开了一种安丝菌素纯化技术，Actinosynnema pretiosum ATCC 31565或Actinosynnema pretiosum ATCC 31281培养液经过热处理后（温度大于75℃），用芳香族溶剂甲苯或二甲苯在45℃左右，以1：1量萃取，浓缩萃取液后结晶纯化。
参考文献：
1． 伊丹等. 安丝菌素P-3 的发酵工艺.中国医药工业杂志.2012,43(4):260-262,293
2． 辛西亚·郭;格雷厄姆·S·宾等. 用于制备安丝菌素的方法[p]. CN101103120, 2008.01.09
3． 杨金亮等. 从珍贵橙色束丝放线菌发酵液中分离纯化安丝菌素的方法[p]. CN101928291A, 2010-12-29
4． 钟建江等. 安丝菌素的固体发酵方法[p].CN101319241, 2008-12-10
5． 钟建江等. 基于异丁醇的安莎霉素P-3生产优化方法[p].CN101914587A, 2010-12-15
6． 钟建江等. 安莎霉素发酵产量提高方法[p]. CN101921817A, 2010-12-22
7． Fulston; Mark et al. Methods for ansamitocin production[p]. US6573074, 2003-6-3
