阿维菌素类农药的残留研究综述
郑岚 王梅 段劲生 张勇 高同春
（安徽省农业科学院植物保护研究所，安徽合肥230031）
摘要：阿维菌素类农药作为抗生素类杀虫药剂，被广泛应用于农业和畜牧业。作为高毒化合物，其在动植物中的作用也不容忽视。综述了阿维菌素类农药在不同基质中的残留检测技术，主要包括高效液相色谱-荧光检测法、液质联用、免疫亲和柱色谱及酶联免疫法等。
关键词：阿维菌素类；农药；残留检测；现状；毒性；方法
中图分类号：S481+.8文献标识码：A文章编号：1007-5739（2011）11-0169-02
阿维菌素类（Avermectins，简称AVMs）是由放线菌产生的一组大环内酯类抗生素，对线虫和体外节肢动物有较强的驱杀作用[1-3]，它具有独特的作用机理，主要通过增强神经传导物质，刺激释放C2氨基丁酸，抑制神经传导，造成细胞功能丧失并干扰神经行动导致虫体麻痹中毒致死，具触杀和胃毒作用，无内吸性，但有较强的渗透作用，且与有机磷、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药无交互抗性，是目前应用最广泛的抗寄生虫药物，被广泛用于十字花科蔬菜、芹菜、莴苣、棉花等作物上。AVMs包括阿维菌素（Avermectin，AVM）、伊维菌素（Ivermectin，IVM）、多拉霉素（Doramectin，DOP）、埃普里诺菌素（又名乙酰基阿维菌素，Eprinomectin，EP）、莫西菌素（Moxidectin，MOX）、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐（Emamectinbenzoate，MAAV）、塞拉菌素（Selamectin，SEL）等。
1·阿维菌素类农药的开发研究现状
阿维菌素（Avermectin B1）是由日本科学家大村智和美国Merck公司于1976年从链霉菌（Strtpomyces avermitilisMA-4680）的发酵产物中得到的1种大环内酯抗生素类杀虫、杀螨剂[2]。阿维菌素类（Avermectins，AVMs），其中根据取代基不同可分为8个组分，而以B1a活性最强，故把B1a（≥80%）和B1b（≤20%）合称作阿维菌素（Avermectin B1）[4-5]（图1）。因同时具有杀虫机理独特、杀虫活性强以及杀虫谱广的特点，阿维菌素作为甲胺磷等高毒有机磷类农药的替代品广泛作用于蔬菜、果树、棉花和花卉等，目前已在很多国家登记使用。
阿维菌素类杀虫剂根据用途主要分为农业用药和畜牧养殖用药2个大类：阿维菌素、伊维菌素、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐主要用作农药，其中阿维菌素、伊维菌素还用于畜牧业和水产养殖；多拉霉素、乙酰基阿维菌素、莫西菌素、塞拉菌素等多用于兽药及水生动物驱虫剂。由于阿维菌素类药剂具备毒性强、杀虫谱广的特点，尤其是其作用机理独特、不易产生抗药性的优势，使得在当前农业生产中的上述4类药剂用于防治害虫时多以复配药剂的形式出现，相关产品有700多种，生产厂家有700余家，年产量达到60万t；如此巨大的使用量必然带来相应艰巨的残留监测任务，而残留毒性水平的高低直接影响到药剂施用剂量和加工剂型的确定，因此建立一套高效准确的残留检测方法也就显的尤为重要。
2·阿维菌素类农药的残留毒性
AVMs作为脂溶性药物，不论以何种途径给药，均能很好地被吸收，可广泛分布于全身组织，体内持续时间长，因而消除缓慢[6]。虽然属于微生物源农药，但是按世界卫生组织5级分级标准，AVMs仍属高毒化合物。迄今为止，AVMs尚无特效的解救药物，只能进行对症治疗。以阿维菌素为例，阿维菌素对大鼠的LD50为10 mg/kg，与对硫磷的LD50（3.5～12.5 mg/kg）相仿，属高毒农药。阿维菌素对哺乳动物的繁殖能力具有潜在毒性作用[7]。因此，国际上对阿维菌素的最高残留限量（MRL）要求非常严格，对其残留指标的检测十分重视，制定了相当严格的MRL值。中国规定在柑桔中MRL为20μg/kg，叶菜为50μg/kg[8]；欧盟详细规定在果蔬产品、谷物中MRL为10μg/kg[8]；澳大利亚等国规定在苹果、梨、番茄等产品上的MRL为10μg/kg[8]；对伊维菌素，我国规定了在叶菜类中MRL为0.2 mg/kg，对甲氨基阿维菌素苯甲酸盐的残留限量我国尚未做出规定，对这些药的残留检测方法标准也尚未出台，故迫切需要加强对阿维菌素类农药的多残留检测研究工作，早日为相关部门制定残留限量标准提供科学依据。
3·阿维菌素类药剂的残留分析方法
目前，已有文献报道了阿维菌素类药剂在叶菜、果菜及土壤中残留检测方法，以及畜产品中的残留分析方法。由于该类药剂分子量大（阿维菌素B1a 873.11，B1b 859.08），GC、GC-MS均无法检出，其残留检测主要运用HPLC来进行研究，分析方法有HPLC-UV分析法、HPLC-荧光分析法和HPLC-MS法，在畜产品上残留分析方法有荧光免疫法、ELISA法等。
阿维菌素类药物的共轭二烯结构在波长为240～250 nm处有强烈的紫外吸收，因此可建立液相色谱-紫外（HPLC-UV）检测方法。一般采用反相液相色谱法，选用C18反相色谱柱，用甲醇与水的混合溶液作为流动相，检测波长为250nm。紫外检测器对阿维菌素类药物的最低检测限为1～2ng/mL[9]，而阿维菌素类药物在体内的最小有效浓度很低，如伊维菌素在血浆中的最小有效浓度仅为0.5～1.0 ng/mL[10]，同时紫外检测器检测选择性不高，易受样品基体杂质的干扰，影响了AVMs的色谱行为，故关于AVMs的UV测定法并不适合AVMs的残留分析，HPLC-UV法多用于制剂中阿维菌素类药物的检测，而很少用于实际样品基质中残留检测。
液相色谱-荧光检测方法（HPLC-FLD）与紫外检测器相比，荧光检测器比紫外检测器的灵敏度接近高100倍，由于AVMs本身没有对称共轭结构，不能直接用荧光检测器检测，只有经荧光衍生化后，生成具有对称共轭的苯环结构才能发射荧光。检测方法是用液液萃取、固相柱萃取（SPE）、固相基质分散（MSPD）、超临界流体萃取等净化方法处理样品后，用三氟乙酸酐和N-甲基咪唑作为衍生化剂，衍生后用高效液相色谱-荧光进行检测。与HPLC-UV比较，此方法可提高检测限，如血浆中的AVM检测限已达到0.02ng/mL。谢显传等人还对阿维菌素荧光衍生反应影响因子做了仔细的研究，探讨了反应温度、光照及衍生产物稳定性等参数对衍生化反应的影响[11]。
液相色谱－质谱检测方法（HPLC－MS）：Howells和Saner以大气压化学电离－质谱（APCI/MS）方法测定了AVM、IVM、EP、DOR、MOX残留，定量限分别为3.1、3.2、2.2、4.0、3.2 ng/g[12]。Gianel等[13]以电子轰击离子化－质谱（EI/MS）方法检测了IVM残留[13]。阿维菌素类药物残留检测的确证方法也得到了长足发展。
4·结语
综上所述，目前针对阿维菌素类农药的残留分析报道方法多采用的是常规有机溶剂提取、净化，而大量使用丙酮、甲醇、二氯甲烷等有机溶剂，对环境容易造成污染，并且操作步骤多、过程繁琐，造成人力财力的巨大浪费。国外报道方法虽然灵敏度达到要求，但使用的固相萃取技术和耗材价格昂贵。因此，要研究出一套消耗试剂少、简便、可操作性强的残留检测标准方法，以最大限度地降低有机溶剂使用，减少环境污染的潜在风险，提高社会效益；减少繁冗的操作过程，提高工作效率，增加经济效益。
5·参考文献：略
