灵芝深层发酵的生产工艺与抗菌素的生产工艺流程基本相同。灵芝的深层发酵工艺流程
斜面培养→摇瓶种子→种子罐→繁殖罐→发酵罐。
(一)斜面培养
(二)摇瓶种子培养
1.培养基 (玉米粉1 蔗糖2 蛋白胨0.2 酵母粉0.3~0.5 磷酸二氢钾0.1 硫酸镁0.06 PH自然)
2.培养方法 将长好的以及种子瓶种子倾入扩大瓶培养液中,培养2~3天,接种量以5%~10%为宜。
3.培养设备 摇瓶机有往复式和旋转式两种。
4.移种标准 由扩大瓶培养的种子进入种子罐之前,摇瓶的菌种应严格检验,菌种的好坏是发酵成败的关键。
(三)种子罐培养
种子罐培养一般分一级种子罐、二级种子罐、三级种子罐。接种量:一级种子罐1%5%;二级种子罐15%~20%;三级种子罐20%~30%。
从种子罐转入发酵罐,其种子液由稀变稠,菌丝体或菌丝球由少变多,镜检见到菌丝体粗壮,细胞内充满原生质,分布均匀,菌丝体处在生长旺盛阶段。
(四)发酵罐培养
(1)菌体形态:灵芝菌丝上无明显“芽头和锁状联合”,菌丝变细,菌丝原生质凝集,少数菌丝有自溶现象。
(2)含量:灵芝菌丝重量15%~20%(湿重),粘度下降,活性成分含量达到要求。
(3)发酵周期:灵芝菌丝深层培养时间控制在96小时左右。
(五)发酵终点的判断
发酵末期,灵芝菌体生长缓慢,菌体细胞衰老进入自溶,菌体分泌能力也下降或停止,发酵产生的生产能力也随之下降或停止。如果继续延长培养时间,既浪费人力和物力,又消耗动力,造成产物成本的增加,也影响到产品质量。
确定放罐的指标有:菌体形态,菌丝含量,产物的产量,碳、氮消耗,PH值变化,过滤速度和发酵液粘度等。
(六)深层培养过程中代谢变化曲线
灵芝深层培养过程代谢变化的曲线,可反映出不同生长阶段代谢变化的情况,并采取适宜的措施,以提高产量和质量,并依次变化规律作为判断发酵终止的依据。
以灵芝菌丝量为目的产物时,发酵终点应控制在72~84小时放罐较为适宜。当以灵芝三萜酸为发酵目的产物时,当菌体生长达到平衡后,灵芝酸才大量形成,其最高峰在80小时左右,而后,灵芝酸浓度下降。所以,必须掌握好发酵终点。
灵芝菌丝在发酵罐中完成灵芝菌丝液后,要进行放罐,处理方法有两种:一是以有效成分为指标,按有效成分中的多糖或三萜类等物质的提取方法进行处理;二是以全液浓缩、烘干制成干物质供药用或将发酵液浓缩、经喷雾制成灵芝发酵精粉。主要用来作为康复产品、医药产品原料。尤其适合癌症患者服用。