对氨基糖苷类抗生素的抗性机理分为三种:
一是磷酸转移酶，称为氨基糖苷-3'-磷酸转移酶，又称新霉素磷酸转移酶（npt），通过将ATP上的磷酸基团转移到抗生素分子上而使抗生素失活。
二是核苷酸转移酶，催化来源于ATP的部分腺苷酸转移
三是乙酰转移酶，催化来源于乙酰辅酶A的乙酰基转移
G418是新霉素的类似物，两者都是通过抑制核糖体的功能和蛋白质的合成而杀死细胞的。neo就是编码3‘磷酸转移酶的基因，它表达的蛋白能够分解新霉素和G418。但是新霉素对真核细胞无作用而G418对细菌和真核细胞都起作用。
G418是一种氨基糖苷类抗生素 ,这种氨基糖类抗生素的结构和新霉素、庆大霉素、卡那霉素相似，在分子遗传试验中,是稳定转染最常用的抗性筛选试剂。它通过抑制转座子Tn601，Tn5的基因,干扰核糖体功能而阻断蛋白质合成,对原核和真核等细胞产生毒素 ,包括细菌、酵母、植物和哺乳动物细胞 ,也包括原生动物和蠕虫。当neo基因被整合进真核细胞DNA后 ,则能启动neo基因编码的序列转录为ｍＲＮＡ ,从而获得抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶的高效表达 ,使细胞获得抗性而能在含有Ｇ418的选择性培养基中生长。Ｇ418的这一选择特性 ,已在基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以广泛应用。
新霉素为氨基糖甙类广谱抗生素，对革兰阴性菌、阳性菌及结核杆菌等都有较好作用,以大肠杆菌最敏感。
