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带你认识磁珠法核酸提取

   日期:2017-11-29     来源:磁珠专家普瑞迈格    浏览:17477    评论:0    
核心提示:导读:近年来,磁珠已成为核酸提取的必备工具之一,而自动化核酸提取设备更是缺少不了的至关重要的组件。那么,你知道磁珠有哪些种类么?核酸提取常用的有哪些磁珠么?他们的优缺点各是什么么?这些问题,就由小芮来一一为您解答吧!
  
 目前核酸提取主要应用在分子诊断、法医侦测、建库、科研实验等诸多方面,还有些大家熟知的用途,比如临床诊断中的个性化用药指导、肿瘤检测、遗传分析、产前诊断等各方面的应用。那么科研和法医、CDC、血站等,要不要用呢?答案是必须的呀!他们可是不可忽略的重点客户群体呢!那么作为以上用途中的重点步骤或者叫“第一步”,它所使用的磁珠到底有哪些种类呢?其区别在哪里呢?
首先第一个问题:什么是磁珠?

磁珠是利用一定的组织包被四氧化三铁核心而形成的可以被磁铁吸附的同时有能通过表面包被物吸附(结合)核酸的神奇的小珠子。之所以说他神奇,是因为他的用途很大!它可以实现核酸提取的自动化和高通量化。那么他的家族有哪些成员呢?由小芮一一说给你听:

1. 硅胶质膜磁珠

这是市场上最早出现的一类核酸结合的磁珠,也是市面上使用最广泛的磁珠之一。其反应原理是高盐离子的条件下核酸和硅胶质膜靠正负电吸附力结合核酸,然后在低盐离子的环境中把核酸洗脱分离,达到核酸提取的目的。

2. 氨基磁珠 

氨基磁珠是在硅胶质膜磁珠的基础上,做了氨基基团的修饰,通过改变溶液的酸碱性,达到核酸与磁珠的结合与分离的效果,当然这种方法的PH值控制要相当的要求,不然会影响核酸的结合和洗脱效果。

3. 羟基磁珠

羟基磁珠是在硅胶质膜磁珠的基础上,加入了羟基修饰基团,其原理与氨基磁珠类似。

4. 醛基磁珠

硅胶质膜磁珠修饰醛基基团后,通过醛基基团结合特异性的引物,钓取特定核酸。但此类磁珠成本较高。另一种醛基磁珠的原理(无特异性引物修饰)与氨基、羟基的结合原理类似。

5. 纤维素包被磁珠

纤维素包被磁珠是目前市面上的另一类磁珠,有别于硅胶质膜系列的磁珠,纤维素膜磁珠表面较为粗糙,相对表面积更大。其原理是利用纤维素膜的亲水性在疏水的环境中与亲水性的核酸结合,这种亲疏水性的结合力(共价键)强于正负电结合力(离子键)。

除了以上几种磁珠外,还有一些应用于蛋白纯化、免疫等方面的磁珠。那么磁珠又是如何应用到核酸提取系统中的呢?小芮来科普一下核酸提取的原理。

先将细胞裂解,然后通过结合液使核酸和磁珠结合。结合后使用洗涤液洗去残留的蛋白和盐离子。然后再将核酸和磁珠分离。怎么样看着过程很简单吧,其实其中有几个关键因素可是会影响核酸的提取效率哦!

1. 磁珠和核酸的结合能力

磁珠法提取核酸的重中之重就在于磁珠和核酸的吸附能力,这直接影响了抽提核酸的产量。而为了改善磁珠结合核酸的性能,各个磁珠生产厂家也是想尽了各种办法,不过目前市面上无非两种磁珠:离子键结合磁珠和共价键结合磁珠。离子键结合磁珠以硅胶质膜磁珠为代表,也是Thermo公司最早研发出的磁珠。这类磁珠由于其使用厂家而越来越多,市场上的试剂盒也层出不穷,但原理都大同小异。那另一类共价键结合的磁珠就是纤维素膜磁珠。由于在这类磁珠是全球性专利磁珠,所以市面上看到的没有硅胶质膜磁珠家族那么多。不过产品线都是一样的哦!两种磁珠均囊括了核酸提取的绝大部分领域:医疗、科研、血站、疾控、法医等各方面领域。产品也包含了全血DNA/RNA提取、植物、动物组织、唾液、细胞、细菌、病毒等检体。而离子键和共价键那个更强更稳定呢?(小芮记得化学老师说过共价键更强更稳定哦)

2. 磁珠表面的磁力

磁珠表面的磁力也是影响核酸提取的一个因素之一。磁珠对核酸的结合能力再强,如果磁铁吸附能力有限,在运作过程中就会丢失很多磁珠(磁珠上可是结合着核酸哦),也就间接地丢失了核酸。因为纤维素膜的特别性,其对磁性的屏蔽能力较差,所以纤维素膜磁珠表面的磁力更强,也就更容易紧紧的吸附在磁力架附近。

3. 设备运作模式

目前自动化设备主要有磁棒法和抽吸法两种,关于此方面的问题,可以咨询小芮公司的同事们,这里就不详细讲啦。带你认识磁珠法核酸提取

随着基因检测、个性化给药、产前诊断等的普及,在全自动化设备全速发展的今天,生物行业也在追求自动化、高通量和便捷性。而磁珠法核酸提取的优势也越来越明显:实现自动化提取、无毒无害的试剂盒、批量化操作等。而目前成熟的磁珠法核酸提取试剂盒、成熟的自动化提取设备将会为生命科学领域的发展提供高效的助力。

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