Microb Cell Fact (2016),DOI:10.1186/s12934-016-0494-7
通讯作者:陈涛。天津大学化工学院教授,博导。
研究方向:基因组尺度代谢网络模型的重构,代谢途径的模拟设计。重要生物基化学品的代谢工程研究和微生物细胞工厂开发。基因简化,底盘细菌。
本文研究主要内容:
基因组简化对生产生物基产物的效率有明显的促进作用。为了得到理想的底盘细菌,研究者们进行了许多工作。有研究表明,基因简化的B.subtilis菌株在生产某些酶类方面较野生株具有明显的优势。但基因简化的B.subtilis菌株对核苷类产品的影响还不清楚。这篇文章构建了一系列不同基因简化程度的B.subtilis菌株,其基因组缺失581.9-814.3kb。并通过代谢通路的改造,使其产鸟苷和胸苷。与野生菌株相比较,基因简化菌株的生产效率大大提高。
1、 细胞生长与底物消耗
随着基因简化的程度增大,比生长速率降低,底物消耗速率也降低,但最终OD变高。
2、 自溶行为
随着基因简化的程度增大,自溶率降低,可能与敲除了与自溶相关的基因有关。
3、 孢子生成
随着基因简化的程度增大,孢子生成率降低,可能与敲除了与孢子结构关的基因有关。
4、 转化效率
随着基因简化的程度增大,转化效率逐渐降低,与细胞的生长时期、生理变化有关。
5、 维持胞内能量平衡所需最低能量
随着基因简化的程度增大,维持胞内能量平衡所需能量越低。
6、 鸟苷
原始菌株 |
改造基因 |
鸟苷产量(mg/L) |
BSF1 |
ΔpurA,pHP13-ppg |
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BSK756 |
ΔpurA ,pHP13-ppg |
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BSK814 |
ΔpurA ,pHP13-ppg |
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7、 胸苷
原始菌株 |
改造基因 |
胸苷产量(mg/L) |
BSF1 |
Δtdk,ΔbdhA::P43-prs,pHP13-untd |
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BSK756 |
Δtdk,ΔbdhA::P43-prs,pHP13-untd |
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8、 总结
基因简化的菌株对核苷类的生产有促进作用。