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枯草芽孢杆菌基因组简化及应用

   日期:2018-05-07     来源:代谢工程与合成生物学    浏览:4242    评论:0    
核心提示:这篇文章构建了一系列不同基因简化程度的B.subtilis菌株,其基因组缺失581.9-814.3kb。并通过代谢通路的改造,使其产鸟苷和胸苷。与野生菌株相比较,基因简化菌株的生产效率大大提高。
  
 原文Title:Characterization of genomereduced Bacillus subtilis strains and their application for the production of guanosine and thymidine


Microb Cell Fact (2016),DOI:10.1186/s12934-016-0494-7


通讯作者:陈涛。天津大学化工学院教授,博导。

研究方向:基因组尺度代谢网络模型的重构,代谢途径的模拟设计。重要生物基化学品的代谢工程研究和微生物细胞工厂开发。基因简化,底盘细菌。


本文研究主要内容:

基因组简化对生产生物基产物的效率有明显的促进作用。为了得到理想的底盘细菌,研究者们进行了许多工作。有研究表明,基因简化的B.subtilis菌株在生产某些酶类方面较野生株具有明显的优势。但基因简化的B.subtilis菌株对核苷类产品的影响还不清楚。这篇文章构建了一系列不同基因简化程度的B.subtilis菌株,其基因组缺失581.9-814.3kb。并通过代谢通路的改造,使其产鸟苷和胸苷。与野生菌株相比较,基因简化菌株的生产效率大大提高。


1、 细胞生长与底物消耗

随着基因简化的程度增大,比生长速率降低,底物消耗速率也降低,但最终OD变高。

2、 自溶行为

随着基因简化的程度增大,自溶率降低,可能与敲除了与自溶相关的基因有关。

 

自溶行为

3、 孢子生成

    随着基因简化的程度增大,孢子生成率降低,可能与敲除了与孢子结构关的基因有关。

 

孢子生成

 

4、 转化效率

随着基因简化的程度增大,转化效率逐渐降低,与细胞的生长时期、生理变化有关。

 

随着基因简化的程度增大,转化效率逐渐降低

5、 维持胞内能量平衡所需最低能量

 

随着基因简化的程度增大,维持胞内能量平衡所需能量越低。

6、 鸟苷

 


鸟苷


 

 

原始菌株

改造基因

鸟苷产量(mg/L

BSF1

ΔpurApHP13-ppg

  1. 21.1

BSK756

ΔpurA pHP13-ppg

  1. 104.2

BSK814

ΔpurA pHP13-ppg

  1. 115.2

7、 胸苷

 


胸苷


 

 

原始菌株

改造基因

胸苷产量(mg/L

BSF1

ΔtdkΔbdhA::P43-prspHP13-untd

  1. 30.2

BSK756

ΔtdkΔbdhA::P43-prspHP13-untd

  1. 151.2

8、 总结

基因简化的菌株对核苷类的生产有促进作用。

 
 
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