带有外源 DNA 的重组质粒，在体外构建后，导入宿主细胞，随着细胞的大量复制、繁殖，才能够有机会获得纯的重组质粒 DNA，该过程称之为转化过程。
准备工作：
从 LB平板上挑取新活化的单菌落（圆形，直径 2～3 mm），接种到5mL LB液体培养基中，37℃过夜培养到对数后期。该菌液作为种子培养基进行二次接种。取1mL过夜培养液，接入100ml LB (或SOB)液体培养基中。 37°C，220rpm，振摇2-4小时，每半小时测一次OD，当OD值达到0.5~0.7之间时，停止培养。
化转感受态的制备
原理
受体细胞经过一些特殊方法（如：CaCl2，RuCl 等化学试剂）的处理后，细胞膜的通透性发生变化，能容许外源 DNA 的载体分子通过。
实验步骤
1.取1mL过夜培养液，接入100ml LB (或SOB)液体培养基中。 37°C，220rpm，振摇2-4小时，每半小时测一次OD，当OD值达到0.5~0.7之间时，停止培养。
2.将培养液转入预灭菌的离心管中,冰上放置10分钟,然后于4℃下4000rpm离心7分钟。
3.弃去上清,在沉淀的菌种中加入15ml的Tfb1缓冲液重悬细菌（用移液器轻轻吹吸），冰上冷却一段时间（BL21 DE3 30min；DH5α 10min）后,4℃下4000rpm离心5分钟。
4.弃去上清,加入2mlTfb2缓冲液重悬细菌，冰上放置几分钟,即成感受态细胞悬液。
5.感受态细胞分装成100μl的小份,此时，可以用新鲜制备的感受态细胞直接做转化实验，也可以将细胞在液氮中快速冷冻后，于-80°C冰箱中长期保存。
6.检测转化效率：取100uL新鲜制备的感受态细胞，加入1ng已知浓度的质粒DNA，冰上孵育后进行42℃热击，冰上冷却2min后将细菌重悬在900uL LB（或SOC）培养液，培养45min-1h复苏细菌，分别取10uL和100uL涂板，估计转化效率。
电转感受态的制备
原理
电击法不需要预先诱导细菌的感受态，依靠短暂的电击，促使DNA进入细菌，转化率最高能达到10^9~10^10转化子/ug闭环DNA。因操作简单，越来越为生物科研工作者所接受。
实验步骤
1.取1mL过夜培养液，接入100ml LB (或SOB)液体培养基中。 37°C，220rpm，振摇2-4小时，每半小时测一次OD，当OD值达到0.5~0.7之间时，停止培养。
2.将菌液在冰上预冷30分钟。同时，开启离心机，预冷至4°C。
3.随后将菌液分装到50ml 预冷的离心管中，4°C，4000rpm离心10 分钟。
4.弃上清液，先用35ml灭菌的Milli Q H2O重悬沉淀的细胞团（用移液器轻轻吹吸），注意低温。4°C，4000rpm离心12钟。
5.弃上清液，重复步骤4；
6.弃上清，往离心管中加入少量 10%甘油(灭菌，预冷)，重悬菌体，再加10%甘油至终体积约为20ml。 4°C, 4000rpm, 离心10min。
7.小心弃去上清（沉淀可能会很松散），最后用 10%甘油(灭菌，预冷)重悬浮细胞，浓缩100倍（100mL菌液最终悬浮在1mL 10%甘油中）。
8.将悬浮菌液以50ul/管分装于1.5ml的离心管中，此时，可以用新鲜制备的感受态细胞直接做转化实验，也可以将细胞在液氮中快速冷冻后，于-80°C冰箱中长期保存。
9.检测转化效率：取50uL新鲜制备的感受态细胞，加入0.01ng DNA，轻轻混合均匀，0.2cm的电击杯，2.5KV,5ms（0.1cm的电击杯，1.7KV,5ms）。电转化后，立即将细菌重悬在950uL LB（或SOC）培养液，培养45min-1h复苏细菌，分别取10uL(1%)和100uL(10%)涂板，估计转化效率。
转化效率
转化效率定义为每1ug的DNA转化过后可形成菌落的数量，如涂板的100uL菌液里含有0.001ng的质粒，结果板上长出200个克隆，则转化效率为：
200 cfu/0.001ng = 2×108cfu/μg
一般转化效率1×10^6cfu/μg DNA可满足普通的亚克隆实验；1×10^7cfu/μg DNA用于作更复杂的亚克隆，有限量的DNA的转化，T-克隆实验；构建文库和突变要求用的转化的效率为>1×10^8cfu/μg DNA
