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L-高丝氨酸的提取方法和应用

   日期:2021-10-28     来源:ChemicalBook    浏览:957    评论:0    
核心提示:L-高丝氨酸还是合成手性除草剂--草铵膦的一种重要中间体,所以在药学和生物学等方面对L-高丝氨酸的研究越来越受到科研工作者的重视。
  
 

背景及概述[1]

L-高丝氨酸(2-氨基-4-羟基丁酸)是一种非蛋白氨基酸,其衍生物不仅可以通过酶促反应转化为其他重要化工中间体,而且其衍生物具有丰富的生物活性,例如可以有效地抑制镰状红细胞、抗真菌药物。L-高丝氨酸还是合成手性除草剂--草铵膦的一种重要中间体,所以在药学和生物学等方面对L-高丝氨酸的研究越来越受到科研工作者的重视。

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提取方法

一种从发酵液中提取L-高丝氨酸的方法,包括以下步骤:

步骤1、发酵液预处理:取5L上罐发酵液,高丝氨酸浓度为35g/L,发酵液调PH值为4,加入20mg/L水溶性壳聚糖絮凝剂,加热至60-80℃处理20分钟,促使水溶性杂蛋白絮凝沉淀,微滤膜除去菌体及絮凝体,获得发酵液清液4.8L,利用卷式超滤膜分离系统,截留分子量为0.5KDa,操作压力为2.0MPa,将发酵液清液中的小分子肽及短链蛋白等物质去除,收集超滤膜透过液4.7L;

步骤2、脱色:将步骤1收集的超滤膜透过液通入规格为5英寸活性炭纤维模块装置脱色,脱色温度为30℃,操作压力0.5MPa,获得脱色液4.7L,脱色液透光率为78.3%,脱色后用70℃热水通入活性炭纤维模块装置进行在线再生循环使用;

步骤3、电去离子:将步骤2中脱色液送入电去离子装置的淡室中,在30V电压下运行,连续检测淡室溶液的导电率,当导电率降到500μs/cm时停止运行,脱盐得到脱盐液,收集脱盐液4.6L;

步骤4、浓缩过滤:将步骤3得到的脱盐液减压浓缩至L-高丝氨酸含量为90%-100%时,浓缩液温度预冷至0℃,按每小时1倍体积向浓缩液中缓慢加入有机溶剂并以50r/min的速度搅拌混匀,待有机溶剂添加量达到浓缩液6倍体积时,停止搅拌育晶5小时,继续按每小时1倍体积流加有机溶剂至浓缩液10倍体积,在5℃条件下结晶16小时,抽滤烘干得到L-高丝氨酸,L-高丝氨酸为122.85g,纯度99.3%,收率为70.2%。

所述步骤1中的发酵液浓度为30-50 g/L,是利用大肠杆菌ZFgs012发酵产生,该菌株于2020年11月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址:中国北京,保藏编号为CGMCC NO.21153,分类命名为大肠埃希氏菌 Escherichia coli。

所述步骤1中的水溶性壳聚糖絮凝剂制备步骤包括:

步骤1-1、配制质量体积比为1:10的壳聚糖溶液;

步骤1-2、加入冰乙酸调节PH值至3.8,充分搅拌并静置12h,其中壳聚糖

的脱乙酰度为95%。

所述步骤3中电去离子装置中淡室所添加的树脂为Cl型717树脂和Na型732树脂混合,浓室中加入0.02mol/L的氯化钠溶液,极室中加入0.2mol/L的硫酸钠溶液,操作电压为30V,得到的脱盐液电导率小于500μs/cm。

所述步骤4中的有机溶剂为乙醇、甲醇和丙酮中的一种。

应用[2]

CN201810523387.7报道了一种精草铵膦的制备方法,特别设计一种以L-高丝氨酸为原料制备精草铵膦的方法。本发明所述精草铵膦的制备方法,以从生物发酵法制得的L-高丝氨酸为起始原料,经共沸脱水、卤代等步骤制得L-3,6-双(2-卤乙基)-2,5-二酮哌嗪,并通过与甲基亚磷酸二酯进行阿布佐夫反应,再经水解反应制得精草铵膦。本发明所述精草铵膦的制备方法,相对于现有制备工艺,大大提高了精草铵膦的总收率,且工艺过程简单,适于工业化生产。#医药中间体#

参考文献

[1] [中国发明] CN202110309816.2 从发酵液中提取L-高丝氨酸的方法

[2] CN201810523387.7一种精草铵膦的制备方法

 
     
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