阿维菌素HPLC分析简析
『阿维菌素简介』
阿维菌素是一种抗生素类药物。主要用于治疗家畜的胃肠线虫病、牛皮蝇蛆、纹皮蝇蛆和猪、羊疥螨病。 本品亦可制成农用杀虫剂、杀螨剂，对广泛寄生于植物上的螨类和 抗性害虫如螨虫(使用5000～8000倍的极低浓度就可以达到很好的防治效果)、 潜叶蝇、木虱、小菜蛾、菜青虫、线虫等具有强烈的触杀、胃毒及内收作用。 本品渗透性强，药液喷到植物叶面后迅速渗入叶内形成众多的微型药囊， 害虫取食和接触药液后立即出现麻痹症状，不活动，不取食，停止发育以致死亡， 杀虫彻底，持效期长且环境相容性好。阿维菌素类药物是目前最优良的一类广谱高效低毒兽用抗寄生虫药物。
『分析仪器条件』
检测器：SHIMADZU SPD-10Avp
泵单元：SHIMADZU LC-10ATvp
工作站：N2000双通道色谱工作站
色谱柱：SHIMADZU ODS 250L × 4.6
柱温：30℃
进样量：20ul
流速：1.0ml/min
检测波长：245nm
检测模式：恒流模式
流动相：甲醇/水（85 ：15），经0.45um微膜滤膜过滤并用超声波脱气30min，静置恢复至室温后备用。甲醇为色谱纯，水为双蒸水。
『仪器稳定性检查』
（1）仪器稳定性检查是在常规HPLC分析中至关重要的步骤。在每次进行HPLC分析时，必须进行仪 器稳定性检查，待仪器处于稳定状态时方可使用。
（2）在分析过程中，应定时或随机检查仪器是否仍然稳定。当出现异常时，应立即停止分析，采取相 应的措施解决致以仪器不稳定的故障；视此次分析结果为不可信，作废处理。
（3）仪器稳定性检查应符合下列要求：
基线平稳
柱温波动范围≤±0.5℃
流速波动范围≤±0.02ml/min （恒流模式）
压力波动范围≤±0.2MPa （恒压模式）
『仪器重现性校正』
待仪器稳定后，将稀释至适宜浓度的阿维菌素标准品连续注入5针，记录5针结果，分别计算：保留时间、峰高、峰面积的相对标准偏差应符合下列要求：
保留时间相对标准偏差≤0.5%
峰高相对标准偏差≤1.0%
峰面积相对标准偏差≤1.0%
『实验结果分析』
（1）下图为阿维菌素标准品HPLC分析图。
（2）图中，基线较平稳（有些许微量杂质影响），标准品的峰形良好，组分B1a与B1b清晰可辨认，分离效果显著，其中B1a理论塔板数为4451.461， 分离度：2.082，拖尾因子：1.253 ，不对称度：1.068 ；B1b理论塔板数为：2326.172，分离度：0.000，拖尾因子：1.127 ，不对称度：1.232 。
（3）下图为本公司阿维菌素成品的HPLC分析图。
（4）图中，基线平稳（杂质较少，影响明显变小，基线更为平稳），样品的峰形仍然良好，组分B1a与B1b清晰可辨认，分离效果显著，其中B1a理论 塔板数为4206.381，分离度：2.009，拖尾因子：1.128 ，不对称度：1.130 ；B1b理论塔板数为： 2203.132，分离度：0.000，拖尾因子：1.109 ，不对称度：1.364 。
『注意事项』
（1）在日常分析工作中，如遇到基线波动，出现毛刺现象，首先应检查检测器的流通池是否有气泡通过或污染； 如因气泡引起，则应将流动相充分超声脱气；如因流通池污染引起，则用异丙醇清洗，清洗方法因仪器而异，请参阅仪器用户说明书。
（2）为减小噪音影响检测的精密度，可在信号线的输出端、传输中端及数据处理端（电脑）分别添加噪音过滤器过滤仪器背景噪音，以便优化数据传输，提高检测精密度。
（3）必须为HPLC系统提供平稳、干净的电源，建议使用精密电源稳压器，以确保仪器工作于稳定状态。
（4）仪器应避免阳光直照；远离大功率干扰磁源。
