黄金1 朱晓光1 徐庆阳1 温廷益1 , 2 陈宁1*
l 天津科技大学生物工程学院天津 300457 2 中国科学院微生物研究所北京生 00080
碳源的补料策略对于发酵法生产 L 一苏氨酸具有至关重要作用，有效的策略是菌体获得良好生长和提高产酸所必需的。本文通过确定碳源、碳源浓度、补料液、补料方式的主要目以提高 L 一苏氨酸产量。结果表明最佳碳源为蔗糖，最佳蔗糖浓度为 70g/L，最佳补料液为葡萄糖，采用恒定溶氧控制的脉冲补料发酵效果最好。同时也证实了调整培养基组成和培养条件可有效提高 L 一苏氨酸的产量。
l 初始碳源对 L 一苏氨酸发酵的影响将葡萄糖、蔗糖、山梨糖、半乳糖、乳糖、麦芽糖等碳水化合物以 80g / L 的初始浓度加入到培养基中，在摇瓶中发酵 48h ，考察对 L 一苏氨酸发酵的影响。在全部测试碳源中，蔗糖最利于 L 一苏氨酸生产菌的生长和产酸。但也不能说明蔗糖是产酸最优的碳源，半乳糖、葡萄糖作为单糖，其浓度的增加可直接导致渗透压的增加，这样就会抑制菌体生长进而致使产酸率的下降。所以有必要对其作进一步的研究以确定最终碳源的选取。
2 初始蔗糖浓度下耗糖情况
在 5L 罐上进行了四批补料分批发酵实验，考察初始蔗糖浓度对 L 一苏氨酸发酵的影响。即使补加蔗糖其耗糖情况亦不明显，说明蔗糖在菌体生长进入稳定期后是产酸的非必需碳源。
3 不同蔗糖浓度对菌体生长和产酸的影响
整个发酵培养过程中，菌体浓度不断增长，前期生长较快后期较慢。在培养的早期阶段，初糖浓度低菌体生长较快，但发酵结束时高糖浓度获得了高的细胞收率。实验结果说明 L-苏氨酸产量由细胞生长速率和总收获的细胞量决定。
4 ．补料液对 L 一苏氨酸产量的影响
将含不同碳水化合物的补料液（ C 摩尔数相同）分别流加至 5L 发酵罐中，进行补料分批发酵，并维持发酵液中碳源浓度在 10g/L左右，考察补料液对 L 一苏氨酸发酵的影响。细胞的总收获量和 L-苏氨酸并无明显差别，考虑到工业成本问题，选择葡萄糖作为 L 一苏氨酸发酵的补料液。
5 ．补料方式对 L 一苏氨酸发酵的影响
根据 L 一苏氨酸实际发酵过程的特点，考察恒速流加、恒残糖流加、恒定溶氧的脉冲流加等流加方式对 L 一苏氨酸发酵的影响。研究证明对于苏氨酸发酵产酸及比产酸速率的提高恒定溶氧的脉冲流加方式是极其有效的。
作者简介：黄金，博士研究生，发酵工程专业，电子信箱： huanjin_979 @ 163.com
