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利用大肠杆菌同型乳酸发酵生产L-乳酸

   日期:2011-01-12     来源:发酵工业网    作者:发酵网    浏览:1774    评论:0    
  
美国佐治亚大学生物与农业工程系分子生物工程中心的研究人员在2007年1月份出版的Appl. Environ. Microbiol.上报道了一株能够同型发酵生产L-乳酸的大肠杆菌代谢工程菌。生产过程分为两阶段,第一阶段是使大肠杆菌好氧生长到光密度30左右,然后切换到厌氧状态,让细胞在非生长状态下生产L-乳酸。所使用的出发菌株是缺失了丙酮酸脱氢酶复合物、丙酮酸:甲酸裂解酶、丙酮酸氧化酶和磷酸烯醇式丙酮酸合成酶活性的E. coli YYC202。YYC202菌株厌氧培养16小时可产90 g/L的乳酸,对葡萄糖转化率为95%,生产强度是5.6 g/L/h。在厌氧培养状态下,YYC202菌株还产生了7 g/L的琥珀酸。在E. coli YYC202中敲除编码富马酸脱氢酶复合物的基因frdABCD,获得了突变株E. coli ALS974。ALS974菌的琥珀酸产量降低到3 g/L,同位素示踪实验证实ALS974菌株产生的琥珀酸是由培养基中添加的乙酸转化而来。在乳酸生产期开始时尽可能地减少培养基中的乙酸浓度,ALS974菌株的L-乳酸产量最高可以达到138 g/L,是合成培养基中大肠杆菌工程菌生产L-乳酸的文献报道最高值。此外,以厌氧阶段为基准计算,ALS974菌株L-乳酸对葡萄糖转化率达到99%,生产强度达到6.3 g/L/h。由于大肠杆菌的营养需求相对简单,生长速度快,因此该研究结果对L-乳酸工程菌的构建具有一定的参考价值。

 
     
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