SGD-IV全自动还原糖测定仪

SGD-Ⅳ型全自动还原糖测定仪使用说明书山东省科学院生物中心（生物研究所）山东省生物传感器重点实验室一、基本原理 全自动还原糖测定仪（SGD-Ⅳ型）是根据费林试剂测定原理设计而成的，其原理与目前国家标准一致；费林试剂是一种氧化剂，由甲、乙液组成。测定时一定量的甲乙液混合，首先形成氢氧化铜，然后形成酒石酸钾铜络合物。次甲基蓝作为滴定终点指示剂，在氧化溶液中呈蓝色，被还原后呈无色。用标准还原糖滴定时，还原糖首先使铜还原，至铜被还原完毕，才使次甲基蓝还原成无色，即为滴定终点。 在滴定过程中，溶液颜色逐渐变化：蓝色→深蓝色→浅蓝色→紫红色→淡紫红色→在终点时突然变化至无色透明。采用光电转换装置，检测滴定过程中透光率的变化（见图一）；根据电压变化曲线由仪器控制系统自动记录、采样、确定滴定终点；根据达到滴定终点时消耗的标准还原糖量，由控制系统自动计算出样品中还原糖含量，并显示和打印结果。滴定过程电信号变化及控制原理（见图二）如下：图一滴定电压的变化曲线图二全自动还原糖测定仪控制原理图二、仪器结构仪器由反应系统、自动控制系统和机壳三部分组成。1、反应系统核心部件为反应池，其剖面结构如图三所示。图三 全自动还原糖测定仪反应池结构图反应系统由滴定池主体构成；滴定池左右两侧有入射光源和光电转换器，滴定池前后两侧有液体进出管道，滴定池内侧有温度传感器和液体加热电极，根据需要调整液体温度；滴定池底部有电磁搅拌器，使滴定液体均匀混合；上部是进样口，可用移液器将被测样品注入滴定池。2、自动控制系统包括电源电路、控制电路、控制面板、微型打印机；按设定程序控制滴定池液体的进出、液体温度、搅拌、光电反应信息的收集和转换、计算、测定结果显示及打印。注射泵自动加入标准液、滴定液、两个蠕动泵可自动完成清洗和排空。全自动还原糖测定仪泵系统如图三所示。图四全自动还原糖测定仪泵系统结构图泵管连接：（1）清洗泵右端口连接硅胶管接蒸馏水瓶（需将该连接硅胶管置于蒸馏水中），左端口连接硅胶管接反应池最上面不锈钢管道（出厂时已连接上）。（2）排空泵左端口连接硅胶管接废液瓶（需将该连接硅胶管置于自备废液瓶水中），右端口连接硅胶管接反应池最下面不锈钢管道（出厂时已连接上）。（3）试剂泵甲、乙液注射器端口各自接相应电磁阀的2号口连接硅胶管（出厂时已连接上），电磁阀1号口连接硅胶管接相应甲、乙液试剂瓶（需分别将该连接硅胶管置于按说明书配置的甲、乙液中），电磁阀3号口连接硅胶管接反应池的甲、乙液不锈钢管道（出厂时已连接上）。（4）滴定泵端口接电磁阀2号口连接硅胶管，电磁阀1号口连接硅胶管接滴定糖瓶（需将该连接硅胶管置于按说明书配置的0.7%滴定糖液中），电磁阀3号口连接硅胶管接反应池滴定糖不锈钢管道（出厂时已连接上）。三、试剂配制 1、试剂名称：（1）硫酸铜（CuSO4•5H2O）（2）氢氧化钠（NaOH）（3）酒石酸钾钠（C4H4O6KNa•4H2O）（4）亚铁氰化钾（K4F4(CN)6•3H2O）（5）无水葡萄糖（C6H12O6）（6）次甲基蓝（7）蒸馏水（8）盐酸2、试剂准备无水葡萄糖（C6H12O6）烘干：103℃烘3小时，常温后放干燥器储存备用。3、试剂配制:（1）次甲基蓝容液（1.0%）：精确称量次甲基蓝10.0g，蒸馏水完全溶解后定容至1000mL，放置于棕色瓶中备用。（2）1.00%葡萄糖溶液（定标糖）即10.00克/毫升葡萄糖溶液：精确称量烘干无水葡萄糖10.000g，蒸馏水溶解后加入5mL盐酸，定容至1000mL，放冰箱中备用。（3）滴定糖溶液（0.7%）：精确称量烘干无水葡萄糖7.0g，蒸馏水溶解后加入5.0mL盐酸，定容至1000mL，放冰箱中备用。（4）甲液：精确称量11.74g硫酸铜（CuSO4•5H2O），溶解后加入7.0mL次甲基蓝容液（1.0%），定容至1000mL。（5）乙液：精确称量4.70g亚铁氰化钾（K4F4(CN)6•3H2O），63.20g氢氧化钠（NaOH），58.50g酒石酸钾钠（C4H4O6KNa•4H2O）依次溶解后定容至1000mL。（6）特殊样品测定时，根据待测液浓度范围，可选定经我方技术人员确定的费林甲乙液浓度。四、面板控制面板如图四所示：图五全自动还原糖测定仪控制面板示意图模式键:待机状态下，按【定标】键定标T2。功能键：开机（接通电源）后，每按一次【功能】键屏幕显示依次显示如下设置参数选项:“排空”：排空泵（1）（默认值为11秒），设定排空泵转动时间。“清洗”：清洗泵（2）（默认值为6秒），设定清洗泵转动时间 。 “试剂”：试剂泵（3）（默认值为11秒），设定试剂泵转动时间，即控制费林试剂进样量。“复位1”：试剂泵复位时间（默认值为19秒）。“复位2”：滴定泵复位时间（默认值为19秒）。“差值”：采样电压，根据不同的样品选择（默认值为3）。“次数”：连续测定次数（默认值为10次）。以上参数可满足特殊用户的需求设定，如设定某项，在其显示状态下输入数值（**.0）并按下输入键，即完成设定，但每次开机均需重复同样的设置。一般用户无需设定。打印键：按键一次取消打印功能，再按一次恢复打印功能。清洗键：正在进行滴定（反应）时，按下此键，即可终止当前反应，进入排空清洗，完成后自动进入下一次测定。复位Ⅰ：按下此键，试剂泵自动排出进样管道中的气泡。如果一次没有完成排空气泡的话，请再按一次该键，直到无气泡为止。（注意：第一次使用时，由于管路中气泡较多，需要连续几次操作。）复位Ⅱ：按下此键，滴定泵自动排出滴定糖管道中的气泡。一次没有完成排空气泡的话，请再按一次该键，直到无气泡为止。（注意：第一次使用时，由于管路中气泡多，需要连续几次操作。）测定键：滴定反应进行中，液晶显示屏上数字变化时，按下此键，这次测定完成后自动进入待机状态，再次按下此键，又开始下一次测定。待机状态时，按下该键自动进行设定次数的测定，默认10次（“次数”设定项）。开始键：仪器接通电源后，按下【开始】键，进入完整测定程序（空白、标定，测定）。数字符号键：用于进行参数设置时的数字输入。小数点键：用于进行参数设置时的小数点输入。五、操作步骤1、接通电源，打开仪器后部右下侧的电源开关，进入待机状态。2、按【开始】键，仪器运行。自动进入稳定程序及定标值T1（空白）、T2（标准）的确定，并按照内存设定次数（默认值为10次）完成一组测定。3、若特殊设置需要调整参数设定，需在打开电源开关后按【开始】键前，重复按压【功能】键进行各参数值设定（如不输入参数值，各参数值则为仪器的初始默认值），按【输入】键完成参数设置。一般不需要重新设定参数，此步骤跳过。4、仪器打印机打印出T1值之后，需手工进行T2值的标定。待液晶屏显示“定标进样”时，用移液器吸取500微升定标用标准葡萄糖（1.00％即10.000克/毫升）溶液注入反应池进行定标，反应完成后仪器自动打印出定标值T2。5、T1、T2值定标完成后，仪器自动进入测定程序。待液晶屏显示“样品进样”时，用移液器吸取500微升待测样品注入反应池，仪器自动完成样品的测定，计算并打印出测定结果。6、一组样品（按“次数”显示设定的测定次数，不进行设定仪器按默认值为10次）测定完成后，仪器进入待机状态。如需继续测定，直接按【测定】键，进入下一个设定次数的测定循环（如不设定，仪器按默认值为10次）。特别提示：测定过程中如果需要暂停，可在滴定过程中（液晶显示屏时间数字跳动时）按下【测定】键，该次测定完成后，自动停机；再次测定只需按下【测定】键，可继续本轮次测定，无需重新定标。7、待机状态下关闭电源开关，即可关机。8、特殊操作说明：（1）滴定过程中（显示屏时间数字跳动时），按下【清洗】键，即可结束该次测定，仪器不打印测定结果，自动重复本次操作。（2）重新定标T2值。在仪器一组测定循环完成后的待机状态下，按下【模式】键，根据液晶屏显示“定标进样”提示时，注入500微升定标用标准葡萄糖（1.00％即10.00克/毫升）溶液，仪器自动完成定标并重新打印T2值。再次按下【测定】键，则按照重新定标的T2值完成下一组测定。（3）重新定标T1值。T1值不能单独定标，如需要重新定标T1值，须在待机状态下，按【开始】键完成T1、T2值定标并进入常规测定程序。六、注意事项1、仪器使用稳压电源。 2、仪器使用两周后反应池要清洗,用清洗液浸泡二分钟,再用注射器排出。 3、谨防反应液溅出。4、反应池装好后请勿随便转动左右耳,谨防漏液。5、正确使用移液器。6、仪器长时间不用时，排除管道中的试剂，注入蒸馏水。七、常见问题及处理措施 出现问题 检查项目 处理措施 开机无反应 检查电源线、 保险管 连接好电源线， 保持保险管完好。 反应池加热不停 检查温度控制器、反应池右耳、搅拌转子 连接好温度控制器插头、反应池右耳旋紧 反应时间显示为99秒 检查甲乙液、注射器、连接管道、搅拌转子、加热温度、发光二极管亮度是否正常，观察滴定是否到终点 保持试剂瓶液面高度，注射器、管道内无气泡、破损、适当调整试剂浓度 测定值漂移 检查注射器、连接管道，搅拌转子、光源、电磁阀、加热温度、反应池进出口堵塞 保持注射器、连接管道无气泡、破损，搅拌转子、光源工作正常。更换电磁阀，疏 通进出口 打印机不走纸 检查打印机、打印纸 更换打印纸 如遇其他问题，请与本中心技术人员联系 附：装机清单：1 还原糖测定仪一台2 微量进样器一个3 使用说明书一本山东省科学院生物中心（生物研究所）山东省生物传感器重点实验室地址：济南市历下区科院路19号邮编：250014电话：（0531）82605742 传真：（0531）82965634邮箱：swdz@keylab.net网址：www.chinasugar.org